一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 克隆与表达

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一步法(快速/无缝)克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
品Pai：百奥莱博
编号：SY0279
英文名：One Step Pcr Cloning Kit
一步法（快速/无缝）克隆试剂盒是一款简单、快速、GX的DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点，可GX克隆50 bp～10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase，Exnase中添加了独特的重组增强因子，显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现GX克隆 (100 cfu/ng Vector)，而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

一步法（快速/无缝）克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。

产品组份：
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定。


图一 实验流程概览

注：插入片段PCR扩增时，引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记)，使得扩增产物5’和3’最末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。
关键词：快速/无缝,SY0279,One Step Pcr Cloning Kit,一步法(快速/无缝)克隆试剂盒


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编号	名称
SY0603	脂质体核酸转染试剂
SY0375	15%预制胶，12孔
SY0128	FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0210	C-REL-GFP报告基因质粒
SY0523	鼠尾胶原蛋白
SY0315	RIPA裂解液(弱)
SY0733	Alexa Fluor 594标记驴抗山羊IgG(H+L)
SY0435	Anti-His标签亲和纯化凝胶
SY0060	VDR萤火虫荧光素酶报告基因质粒
SY0096	Oct4-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY1066	Bcl-2YZ剂(GDC-0199)
SY0173	HSF-GFP报告基因质粒
SY0398	巯基蛋白琼脂糖偶联树脂
SY0598	细胞可渗透*离子荧光探针
SY0076	ISRE-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0427	S-Tag 多肽
SY0466	雨蛙肽(雨蛙素)
SY0658	兔抗GST-tag多克隆抗体
SY0653	兔抗HA-Tag多克隆抗体
SY0595	一氧化*(代"氮")检测探针
SY0393	His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂
SY0589	iFluor 647标记鬼笔环肽(远红)
SY0078	HIF-1-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0734	R-藻红蛋白标记驴抗山羊IgG(H+L)F(ab)2片段
SY0633	兔抗β-肌动蛋白多克隆抗体
SY0194	TCF/LEF1-GFP报告基因质粒
SY0402	MBP标签蛋白纯化预装柱，1ML
SY0231	SRE-GFP报告基因质粒
SY0513	分散酶II
SY0610	重组人IL-4
SY0636	兔抗GAPDH多克隆抗体
SY0052	腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP)
SY0009	10×STE Buffer(无菌)
SY0416	36mm透析袋(透析分子量14kDa)
SY0709	Alexa Fluor 488标记兔抗山羊IgG(H+L)
SY0545	支原体去除试剂3(100X)
SY0613	重组人IFN-β1b