一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) 蛋白质研究

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) 是高品质的蛋白质研究产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) 蛋白质研究
英文名：One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：30次
编号：BTN100908B
本产品是在SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)套装基础上改良而得，主要改良的地方有两处：一是配胶液的pH偏酸，二是将还原剂加入到电泳液中。

产品特点：
1．偏酸的pH使PAGE胶比常规SDS-PAGE 更加稳定，便于配预制胶，增加实验的可重复性。
2．能降低蛋白质的脱*反应和烷基化反应，也能阻止蛋白质的二硫键再生成。
3．把还原剂整合到电泳液中，避免了蛋白质在电泳过程中重新形成二硫键，蛋白条带比常规SDS-PAGE 更加锐利。
4．可把分离胶和浓缩胶配胶液整合成一个，成分更简单。
5．更换电泳液即可用于不同大小的蛋白(A型电泳液适合20 kD以上蛋白，B型适合2-50 kD蛋白)，分离多肽时不需要Tricine-SDS-PAGE。
6．即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。
7．安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
8．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

产品组成：

 

成分	30T(A)	30T(B)
丙*(代"烯")酰胺(干粉)	60g	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺(干粉)	3g	3g
长效期SDS-PAGE 配胶液，4×	200ml	200ml
长效期SDS-PAGE还原剂	10ml	10ml
TEMED	1.5ml	1.5ml
过硫*(代"酸")铵	1g	1g
长效SDS-PAGE上样液，5×	1ml	1ml
长效期SDS-PAGE电泳液A型	20L	-
长效期SDS-PAGE电泳液B型	-	20L
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、使用本产品不需要浓缩胶，直接配制分离胶。如果使用A型电泳液(分离30 KD以上蛋白质用)，配制10%的PAGE胶；如果使用B型电泳液(分离2-30 KD的蛋白质用)，配制12%的PAGE胶。也可以选择其他胶浓度，但各成分用量需要按比例调整。
1．DY次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水，充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2．DY次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(简称30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对长效期SDS-PAGE电泳，丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1，因为此时PAGE胶的孔径最小，分辨率ZG。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中，摇晃溶解即得30%的AB溶液，该溶液4℃避光(可包上锡箔纸壁光)保存并在一个月内用完。30% AB溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。
3．新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL 去离子水的比例将去离子水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4．本产品不需要配制分离胶和浓缩胶两种胶，只需要配一种连续胶。配制方法如下(以下是以配制10mL的胶的用量为例，用户自己需要根据胶的大小决定所需体积)：

胶浓度	用量(mL)			总体积 (mL)
	去离子水	30% AB溶液	4×长效期SDS-PAGE配胶液
10%(对A型)	4.20	3.30	2.50	10
12%(对B型)	3.50	4.00	2.50	10

5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。
7．在胶的液面达到顶部的时候停止灌胶并插入梳子，室温聚合30-60分钟(低温YZ聚合反应)。
8．拔出梳子，用水冲洗加样孔。
9．配制的PAGE胶可以在4℃长期放置数月，直到使用。注意：需要盖上1×长效期SDS-PAGE 配胶液，否则PAGE胶会变干而无法使用。
10．使用时，将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够量的1×长效期SDS-PAGE电泳液(A型或B型)。
 注意：长效期SDS-PAGE电泳液A型或B型均以干粉形式提供，足够配20 L 1×电泳液。配制时需将全部干粉(含多种没有充分混合的成分，必须一次性全部使用)溶解在去离子水中，并定容到1 L，得到20×长效期SDS-PAGE电泳液，使用时再用去离子水稀释成1×电泳液。20×长效期SDS-PAGE电泳液不需要调pH，可以室温放置。
11．在上槽中加入适量的1×长效期SDS-PAGE电泳液和1/200 体积(以电泳液体积为基数)的长效期SDS-PAGE还原剂并用玻璃棒搅拌混合均匀。
12．在蛋白质样品中加入5×长效期SDS-PAGE上样液(8μL样品加2μL上样液)，72℃加热10分钟。注意：上样液中的一些成分在低温保存时会沉淀，所以用前需要65℃保温10分钟左右使沉淀溶解，混匀后才能使用。上样液中的2-巯基乙*(代"醇")容易挥发，使用多次后用户可以在10μl样品(蛋白质样品+上样液的混合液)中补加0.5μl自备的2-巯基乙*(代"醇")原液，以便使蛋白质充分变性。如果样品是蛋白质沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白质)，则需要用Tris缓冲液将其pH调到中性(可用pH试纸检测)，否则残留溶剂可能会改变上样液的pH，严重影响电泳效果。
13．短暂离心，取上清液上样。上样的蛋白总量跟检测方法相关，如果用银染，可以只上样ng级别(对每条带的蛋白量而言)，如果用考染，需要上样μg级别(对每条带的蛋白量而言)。
14．用150V恒压电压进行电泳，直到染料进入胶底部(在B型电泳液中，*酚蓝的速度相当于3-5 KD的蛋白质)。注意：在长效期SDS-PAGE中的电泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型电泳液中的速度又快于A型电泳液。过程中，电流会降低，属于正常现象。
15．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或转膜)。注意：Western转膜需要专门的转膜液(百奥莱博可以提供)。

二、如果需要更高分辨率，也可把上法配制的胶当成分离胶，并在其上再叠加4%的浓缩胶，操作如下：
16．按上面方法配制分离胶，只是倒胶后在胶面距离顶部1.5cm的时候，或者距梳子齿0.5cm时，停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm 厚的水，使胶顶部液面平整。室温聚合30-60分钟(低温YZ聚合反应)后，用1×长效期SDS-PAGE 配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。
17．配制4%浓缩胶(参考上节第4-6 步)。倒胶后在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子，室温聚合30-60分钟(低温YZ聚合反应)。
18．拔出梳子，用1×电泳液(A型或B型)冲洗加样孔，后续处理接第7步。

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F030103 HRP标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*HRP
ARB13294 小鼠糖皮质类固醇受体(GR)Elisa分析 Mouse glucocorticoid receptor,gr ELISA KIT
F050101 辣根酶标记盐*(代"酸")克伦特罗 HRP*Clenbuterol
ARB10238 人ω干扰素(IFN-ω)ELISA检测服务 Human interferon ω,ifn-ω ELISA KIT
ARB13913 猪抗凝血酶受体(ATR)elisa测定使用说明书 Porcine anti-thrombin receptor,atr ELISA KIT
F030303 胶体金标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*GOLD
PY01-039  核黄素(VB2)  10克  
CBZ-L-亮*酸 Chlormequat chloride 2018-66-8
F010105 小鼠抗HIV(P24)抗体 Monoclonal Mouse Anti-HiV(P24)
ARB13443 鸡白介素18(IL-18)酶联免疫定量检测 Chicken interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
ARB10766 人抗Ku抗体(Anti-Ku-Ab)检测服务 Human anti-ku-antibody ELISA KIT
BTN80808 蛋白酶YZ剂混合液 Protease Inhibitor Cocktail
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Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH7.4)   500ml
ARB13184 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)血清中含量检测 Mouse insulin receptor β,isr-β ELISA KIT
戊二酸酐 3-Pyridylacetic acid hydrochloride 108-55-4
PY02-196  碱性琼脂  250克  
ARB11129 人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)免费代测 Human pulmonary activation regulated chemokine,parc ELISA KIT
ARB14187 小鼠雄激素受体(AR)含量检测 
ARB12432 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)检测服务 Rat bone morphogenetic protein receptor 1a,bmpr-1a ELISA KIT
9004-67-5 Methyl Cellulose  甲基纤维素
ARB10612 人血红蛋白H(HbH)代做ELISA实验 Human hemoglobin h,hbh ELISA KIT
总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶微板法)   100T
5-硝基邻菲啰啉 F6P 4199-88-6
ARB14212 鹅肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa方法检测 
PY04-107  脱纤维羊血  7ml/支×10支  每支添加于95ml 灭菌冷却至48℃的血琼脂琼脂基础中，用于营养要求较高的细菌培养及溶血试验
ARB11707 人黑色素细胞抗体(MC Ab)酶免分析 Human melanocyte antibody,mc ab ELISA KIT
2-脱氧-2,2-二*-D-赤型-1-呋*(代"喃")酮糖-3,5-二*甲酰酯 Acetylene tetrabromide 122111-01-7
一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) 蛋白质研究关键词：一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD),BTN100908B,One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)


·RNAse-free水
编号：BTN80403
英文名称：RNase-free Water
规格：1mL
本产品就是DEPC处理过的水，但是经过RNase-free质检，所以没有RNase污染。可以用于与RNA相关的实验。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·PCR级绿如蓝DNA染料
编号：BTN70909
英文名称：DNAgreen, PCR Grade
规格：0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会YZ荧光PCR，所以反应重复性很不稳定，并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样，是第三代饱和型荧光染料，在饱和浓度下也不YZ荧光PCR反应。

产品特点：
1. 饱和浓度不YZPCR反应，因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位，因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系，可以用于精细的Tm 测定实验，如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近，可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内，毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。

储存条件：常温运输、-20℃避光保存，有效期一年。

使用方法：
先将本产品放置在室温融化，然后震荡10秒钟，短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用：

1.在一干净的PCR 管中，加入下列成分：

试剂	加入量
10×PCR Buffer(No Mg2+)	5μl
MgCl2 50mM	2.5μl
dNTP 10mM	1μl
本产品(PCR级绿如蓝染料)	2.5μl
Taq DNA聚合酶	1-5U
DNA模板	适量
PCR引物	5-50 pmol each
补水到	50μl

2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR，并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。

注意事项：
1. 如果使用iCycler，可以不加FAM；如果使用ABI系统，需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”；使用LightCycler时，在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶，可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。

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