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LncRNA测序

产品信息
  • LncRNA测序及信息分析

    简介
        lncRNA(long non-coding RNA)是一类长度超过 200nt 的长链非编码 RNA,通过与 DNA、RNA或蛋白质结合,在表观遗传、转录及转录后等水平调控基因表达。其中常见的,具有调控作用的非编码 RNA 包括 miRNA、piRNA以及长链非编码 RNA。研究者的大量研究表明非编码 RNA 在表观遗传学的调控中扮演了越来越重要的角色。

    技术原理
        采用特定方法(如采用Ribo-Zero TM系列Kit)降低样本中 rRNA 的丰度,对富集到的 RNA 进行文库构建。通过高通量测序仪产出数据,并结合生物信息分析软件,将构建出的转录本与已知 lncRNA 数据库进行比对,筛选出已知 lncRNA;将未比对上转录本与已知蛋白数据库比对进而去除比对上的序列,然后进行CPC(Coding Potential Calculator)预测新 lncRNA,并基于二级结构的保守性对 lncRNA 进行家族分类。ZH,对预测的新 lncRNA 和已知 lncRNA 进行功能分析,从而快速全面准确地获得与特定生物学过程(例如发育、疾病等)相关的 lncRNA 信息。

    技术优势
            1.   基于高通量测序技术,一次性可以全面获得样本中lncRNA信息;
            2.   不局限于对已知lncRNA的研究,还可进行novel lncRNA预测、功能注释等;
            3.   技术稳定,建库重复性好,同一样本重复建库相关性好。

    技术路线


    分析流程



    样品要求
    1.   样品类型:细胞、新鲜组织或 RNA 样品。
    2.   样品量:细胞样品请提供至少1×107个细胞,组织样品请提供至少300 mg的组织块或切片,RNA样品请提供10 μg以上的总 RNA
    3.   样品质量:RNA 无明显降解,提取的总RNA OD260/280值在1.8-2.2之间,浓度≥500ng/μL,28S:18S≥1.5,Rin≥7
    4.   样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成短波浪号~50 mg的小块)可用 TRIZOL 或 RNA 保护剂处理或液氮冻存后,-80℃保存。RNA 样品可溶于乙醇或RNA-       free的超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。
    5.   样品运输:样品置于1.5mL管中,Parafilm 膜封好,干冰运输。


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