北京Pfu DNA聚合酶(Pfu酶)(含buffer)现货供应

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名称：Pfu DNA聚合酶(Pfu酶)(含buffer)
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Pfu DNA Polymerase
规格：200U|1000U
pfu DNA 聚合酶简称Pfu酶，是最常用的高保真DNA聚合酶之一。Pfu DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Pyrococcus furiosus的高度热稳定的DNA聚合酶。Pfu酶的分子量为90kDa。Pfu酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同，Pfu酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外，Pfu酶有5’至3’外切酶活性，但Pfu酶没有反转录酶活性。

由于Pfu酶有3’至5’的外切酶活性，因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低，出错率为2.6×10e-6。Pfu的出错率不仅远远低于Taq酶，也低于一些其它的高保真DNA聚合酶例如Vent、DeepVent、Pwo、Tli等，因此Pfu酶常作为的高性价比的高保真DNA聚合酶。

来源：本Pfu DNA Polymerase为recombinant Pfu DNA Polymerase，通过大肠杆菌表达纯化获得，和纯化获得的天然Pfu DNA Polymerase在各方面的性质相同。

用途：高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、双平端PCR克隆等。
1）Pfu酶扩增出来的DNA片断为双平端，可以用于双平端克隆，但不能用于常规的T载体克隆。
2）dUTP和dITP或含有dUTP和dITP的引物不能用于Pfu酶介导的PCR扩增反应。

活性定义：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 8.2), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。

10×Pfu Buffer (with Mg2+)：200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 100 mM KCl,1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。

失活或YZ：酚*仿抽提可以使Pfu酶失活。

储存条件：-20℃。

注意事项：
1）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Pfu酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2）Pfu DNA polymerase在扩增DNA片断时的出错率非常低，但其扩增效率也比较低。对于出错率要求不高的情况，例如RT-PCR进行定量或半定量，推荐使用Taq DNA polymerase。在扩增效率和出错率需要兼顾的情况，可以选择YTTaq DNA polymerase。在扩增2kb以下DNA片断时，Pfu酶和Taq酶的扩增效率相近。在准确性要求很高的情况下，须选择Pfu酶。
3）Pfu酶有3’至5’的外切酶活性，在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此Pfu酶一定要ZH加入，并且要在冰浴上操作。
4）不能使用Taq酶的PCR Buffer来替代Pfu酶的PCR Buffer。
关键词：Pfu DNA聚合酶(Pfu酶)(含buffer),Pfu DNA Polymerase,YT372


除北京Pfu DNA聚合酶(Pfu酶)(含buffer)现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：

编号	名称
YT351	JNKYZ剂(SP600125)
YT068	Western洗涤液(WB洗涤液)
YT626	考马斯亮蓝G250
YT168	甲基绿-派洛宁染色液(MGP染色液)
YT696	兔抗CD3ζ链抗体
YT294	蛋白去除试剂S
YT534	R-羰基还原酶
YT740	兔抗MGMT抗体
YT350	磷酸酯酶YZ剂(Sodium orthovanadate)(正钒酸*)
YT682	小鼠抗BAX蛋白抗体
YT614	RIPA裂解液(强，无YZ剂)
YT259	STAT5凝胶迁移探针(10μM)
YT865	Cy3标记山羊抗大鼠IgG(H+L)
YT010	DNA凝胶回收试剂盒
YT635	AIF抗体(凋亡诱导因子抗体)
YT749	小鼠抗p53抗体
YT513	T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
YT385	dATP溶液(100mM)
YT934	雄激素受体YZ剂(恩杂鲁胺)(MDV3100)
YT708	兔抗Desmin抗体
YT432	硫*(代"酸")卡那霉素溶液(细菌培养用)
YT677	兔抗HA标签抗体
YT052	SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)
YT044	组织线粒体纯化试剂盒
YT726	小鼠抗HSP60抗体
YT747	小鼠抗OCT-4抗体
YT092	Kisser封片液
YT096	抗荧光淬灭PVP封片液
YT806	IkB-α抗体
YT851	AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
YT632	磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体
YT815	JNK抗体(SAPK抗体)
YT276	iNOSYZ剂(L-Canavanine)(诱导型一氧化*(代"氮")合成酶YZ剂)