产品及特点
分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体DNA两个5′端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以YZ自连反应。此外在进行DNA或RNA5′端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。其反应示意图如下：
它具有下列特点：
1. 基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。
2. 把DNA和RNA 5′端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。
3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。
4. 处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。
DNA去磷酸化试剂盒-DNA Dephosphorylation Kit使用及效果
在离心管中加入不超过10 pmolDN**段、10×去磷酸缓冲液、细菌碱性磷酸酶超纯水，65℃反应30分钟。酚氯仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA待用。2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料） 0.5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料） 5ml
超纯 dNTP Mixture(2.5 mM each) 1ml
超纯 dNTP Mixture(2.5 mM each) 5×1ml
超纯 dNTP Mixture(10 mM each) 1ml
超纯 dNTP Mixture(10 mM each) 5×1ml
dATP 100mMsolution 0.25 ml
dCTP 100mM solution 0.25 ml
dGTP 100mM solution 0.25 ml
dTTP 100mM solution 0.25 ml
PCR enhancer 100μl
PCR enhancer 500μl
TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase （反转录酶） 5000U
10000U
10000U X 5
"TUREscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit （DY链反转录试剂盒）
" 25次
50次
" TUREscript One Step RT-PCR Kit （一步法反转录试剂盒）
" 25次
50次
" TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit （两步法荧光定量反转录试剂盒）
" 25次
50次
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600） 50T
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600） 500T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200） 50T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200） 500T
