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cDNADY链合成试剂盒-1st-Strand cDNA Synthesis Kit

产品信息
  • cDNADY链合成试剂盒-1st-Strand cDNA Synthesis Kit

    产品及特点

    本试剂盒提供合成cDNADY链所需要的全部试剂。其原理是用莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV RT)GX合成mRNA的全长cDNA拷贝。在基因特异性引物存在条件下,此单链cDNA产物可直接用来进行PCR扩增,或进行其它下游操作,包括合成cDNA第二条链、构建cDNA文库、核酸杂交等。基于Oligo(dT)引物的cDNA合成原理如下:

    1. 使用突变的反转录酶,内源RNase H活性低。

    2. 最长可合成13 Kb的cDNA。

    3. 可以使用oligo-dT、随机引物和RNA专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。

    4. 总RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA均可作为模板。

    5. 可用于cDNA文库构建、RT-PCR、探针标记等。

    cDNADY链合成试剂盒-1st-Strand cDNA Synthesis Kit使用及效果

    在无菌管中加入1-10 μ L(1 ng-2 μ g)总RNA ,1 μ L引物,加无核酸酶污染水补至13 μL,70℃加热5分钟后立即冰浴,再加入5 uL RT Buffer(含dNTP),37℃保温5分钟。继续向反应液中加入2 μ L M-MLV反转录酶(含RI),反应终体积 为20 μ L。42℃温育1小时。70℃ 保温10分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。反应产物即为cDNA。Western封闭液(BSA型)    100ml
    脱脂奶粉    100g
    Western洗涤液    250ml
    Western一抗二抗去除液    250ml
    BCIP工作液 50mg/ml    100ul
    NBT工作液 50mg/ml    100ul
    10% Sodium Azide (叠氮钠)    100ml
    胰酶细胞消化液    100ml
    L-Glutamine(100X)    100ml
    Hanks' Balanced Salt Solution    500ml
    7.5% NaHCO3溶液    100ml    
    LB (premixed LB,粉末可配500ml/瓶)    1瓶
    青霉素-链霉素溶液(100X)    100ml
    氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
    氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    10ml
    羧苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
    硫酸卡那霉素贮存液 100mg/ml    1ml
    硫酸卡那霉素贮存液 100mg/ml    10ml
    氯霉素贮存液 34mg/ml    5ml
    硫酸链霉素贮存液10mg/ml    5ml
    盐酸四环素贮存 50mg/ml    5ml
    利福平贮存液 50mg/ml    1ml
    G-418贮存液 50mg/ml    1ml
    IPTG工作液 200mg/ml    1ml
    X-Gal工作液 20mg/ml    5ml
    PBS(1X)    500ml
    PBS(10X)    100ml
    2.5mg/ml鲑鱼精DNA    1ml
    2.5mg/ml鲑鱼精DNA    10ml
    5mg/ml鲑鱼精DNA    1ml
        5ml

    温馨提示:不可用于临床ZL。
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