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猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-HP)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)

产品信息

  • 猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-HP)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
    特点优势:
    1.   特异性:
    2.   重现性:   
    3.   灵敏性:
    4.   实用性:  
    猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-HP)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)性能指标:
    1. 试剂盒检测特异性为100%
    2. 检测试剂盒重现性为100%
    3. 灵敏度可达到103/ml
    4. 有效期为6个月
    猪瘟/高致病性猪蓝耳病病毒(CSFV/PRRSV-HP)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
    ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
    ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
    ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
    ⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
    ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
    ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
    引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以ZD引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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    猪瘟病毒(CSFV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)    50T/100T    保存:-20 ℃, 保质期一年。
    温馨提示:不可用于临床ZL。
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