YT189 凝胶迁移探针生物素标记试剂盒

规格：20次

产地：国产|进口

英文名：EMSA Probe Biotin Labeling Kit

品Pai：百奥莱博

本试剂盒是通过TdT把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3"末端，然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率，3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下，TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。



本试剂盒适合标记纯化的单链DNA，如果用于标记EMSA探针，可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo，可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol，本试剂盒可以用于20个标记反应。



试剂盒组份：

TdT Buffer(5X)———————————250μl

TdT(10U/μl)————————————20μl

Biotin-11-dUTP(5μM)————————100μl

Biotin-Control Oligo(0.4μM)————100μl

Ultrapure water———————————1ml

探针标记终止液———————————200μl

TE—————————————————15ml

退火缓冲液(10X)——————————150μl





储存条件：-20℃。



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·YT™免疫组化染色二抗稀释液

编号：YT889

英文名称：YT™ Secondary Antibody Dilution Buffer for Immunohistochemistry

规格：100ml

本品是新一代的快速GX封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、血清等的二抗稀释液，可以用于免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry, IC)染色时二抗的稀释和配制。



YT™免疫荧光染色二抗稀释液可以有效节约二抗。经本产品稀释的二抗可以在2-3周内重复使用3-5次。



YT™免疫组化染色二抗稀释液稀释的二抗孵育后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。



YT™免疫组化染色二抗稀释液兼容性好，兼容辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂等物质，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，也不会干扰基于生物素的荧光检测。



YT™免疫组化染色二抗稀释液使用便捷。本产品无需添加任何额外的试剂，可以直接用于二抗的稀释。





图1. YT™免疫组化染色二抗稀释液用于免疫细胞化学(IC)的检测效果图。上图为HeLa细胞用一抗α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody 和二抗辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)，并用DAB显色的检测效果图。图中可见非常清晰的红色荧光的微管形态。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。



按照每次二抗稀释需要5-10ml二抗稀释液计算，一个包装的YT™免疫组化染色二抗稀释液可以稀释10-20次二抗。



注意事项：为了能使稀释的二抗可以反复多次使用，二抗孵育结束后稀释的二抗应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。



储存条件：4℃，有效期一年。





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·小鼠抗CD44抗体

编号：YT699

英文名称：CD44 Mouse Monoclonal Antibody

规格：50μl

本品为来源于小鼠的抗CD44的单克隆抗体。

宿主：小鼠

克隆性：单克隆抗体

用途：WB,FCM,IHC

交叉反应性：人

分子量：80KDa

推荐稀释比例：WB(1:500-1:1000),IHC(1:200),FCM(1:100-1:200)

about this Antibody
Name	CD44 Mouse Monoclonal Antibody
Category	Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody
Isotype	IgM
Purification	ProA affinity purified
about the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to a region of CD44.
Gene ID	960
SwissProt	P16070
Synonyms	CDW44; CSPG8; ECMR-III; HCELL; IN; LHR; MC56; MDU2; MDU3; MGYT1778; MIC4; MUTCH-I; Pgp1
Category	Immunology and Inflammation
Background	CD44 is a cell-surface glycoprotein postulated to play a role in a variety of biological processes, including lymphocyte homing and tumor-cell metastasis. It mediates cell-cell and cell-matrix interactions through its affinity for hyaluronic acid (HA), and possibly also through its affinity for other ligands such as osteopontin,collagens, and matrix metalloproteinases (MMPs). Adhesion with HA plays an important role in cell migration, tumor growth and progression. CD44 is highly polymorphic, possesses a number of alternative splice variants and undergoes extensive post-translational modifications.

注意事项：

1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。

2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。



储存条件：-20℃，有效期一年。





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·Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)

编号：YT310

英文名称：Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8

规格：100次

本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。



试剂盒组分：

SOD检测缓冲液———————70ml

WST-8———————————800μl

酶溶液———————————100μl

反应启动液(40X)——————60μl

Cu/Zn-SODYZ剂A——————500μl

Cu/Zn-SODYZ剂B——————500μl



超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。



目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，YZ百分率达不到等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。



目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所YZ。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。





基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。



WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，Z大YZ百分率可以接近，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。



本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。



哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中，含量Z高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中，并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD，extracellular SOD，简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD，和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。综上所述，细胞或组织内共有两类SOD，即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的YZ剂YZ其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性，就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。



KCN或NaCN可YZCuZn-SOD酶活性，也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒，并且对Cu/Zn-SOD的YZ百分比达不到很接近。



本试剂盒采用了一种的两步双重YZCu/Zn-SOD的方法，在避免使用有毒*(代"药")品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的YZ百分比达到高度接近，即对于Cu/Zn-SOD的YZ效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。



注意事项：

1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。

3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。

4. Cu/Zn-SODYZ剂A对人体有刺激性，使用时请注意适当防护。



储存条件：-20℃，有效期6个月。

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