YT189 凝胶迁移探针生物素标记试剂盒

特别提示：包括凝胶迁移探针生物素标记试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：凝胶迁移探针生物素标记试剂盒

英文名称：EMSA Probe Biotin Labeling Kit

产品货号：YT189

产品规格：20次



本试剂盒是通过TdT把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3"末端，然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率，3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下，TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。



本试剂盒适合标记纯化的单链DNA，如果用于标记EMSA探针，可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo，可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol，本试剂盒可以用于20个标记反应。



试剂盒组份：

TdT Buffer(5X)———————————250μl

TdT(10U/μl)————————————20μl

Biotin-11-dUTP(5μM)————————100μl

Biotin-Control Oligo(0.4μM)————100μl

Ultrapure water———————————1ml

探针标记终止液———————————200μl

TE—————————————————15ml

退火缓冲液(10X)——————————150μl





储存条件：-20℃。



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名称：凝胶迁移试剂盒(EMSA试剂盒)

货号：YT185

规格：100次

本试剂盒是用于EMSA(也称gel shift)研究的一个试剂盒。通过EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况，从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。本试剂盒提供了进行EMSA实验的探针标记、蛋白和DNA结合以及EMSA上样等的主要试剂，使EMSA实验变得简单方便。



试剂盒组份：

T4 Polynucleotide Kinase————————————100U

T4 Polynucleotide Kinase Buffer(10X)——————100μl

Nuclease-Free Water——————————————1ml

探针标记终止液—————————————————100μl

5M 醋酸铵———————————————————600μl

EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)——————————200μl

EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(蓝色，10X)——————200μl

EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(无色，10X)——————200μl

TE———————————————————————1ml/管，共2管



EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)中含有poly(dI-dC)等有效成分。其中poly(dI-dC)的浓度经过优化，可以很好的消除蛋白和标记探针间的非特异性结合，同时又不会减弱目的转录因子和标记探针间的结合。



每个EMSA/Gel-Shift试剂盒足够标记10-20次探针，足够进行100个蛋白和探针的结合反应。



注意事项：

1. 需自备待标记的EMSA探针，需自备用于探针标记的同位素，需自备EMSA胶配制的相关试剂。

2. 细胞核蛋白的抽提可以使用百奥莱博的细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(YT041)。

3. 如需做super-shift，需自备用于super-shift的抗体。

4. 本实验涉及到同位素的操作，请严格按照同位素的相关管理条例进行操作。



储存条件：-20℃，有效期一年。



名称：洗涤液(5X，YT190专用)

货号：YT192

规格：250ml

本洗涤液是用于百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的专用试剂。化学发光法EMSA试剂盒中已经提供了适量的洗涤液(5X)，但在某些需要使用较大量洗涤液(5X)的情况下，可以购买本试剂用于化学发光法EMSA试剂盒的相关检测。



储存条件：4℃。



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货号	名称	规格
YT186	EMSA结合缓冲液(Gel-Shift结合缓冲液)(5X)	100次
YT187	EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色，10X)	200次
YT188	EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(蓝色，10X)	200次
YT192	洗涤液(5X，YT190专用)	250ml
YT194	AP1凝胶迁移探针(10μM)	30μl
YT200	生物素标记AP2凝胶迁移探针(0.2μM)	200μl
YT201	AP2凝胶迁移突变探针(1.75μM)	60μl