天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
1-亚硝基吡咯烷;N-亚硝基吡咯烷 1-Nitrosopyrrolidine
1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid
1-十三醇 1-TRIDECANOL 97%
1-乙烯基咪唑 1-VinyliMidazole
2,2,3-三甲基丁烷;异丙基三甲基甲烷;五甲基乙烷 2,2,3-TriMethylbutane;Triptane;PentaMethylethane
2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇 2,2,4-TriMethyl-1,3-pentandiol
2,4,5-三甲氧基苯甲醛;细辛醛 2,4,5-TriMethoxybenzaldehyde;Asarylaldehyde;2,4,5-Trihydroxybenzaldehyde triMethyl ether
米托坦 2,4-DDD
O,P'-滴滴涕 2,4-DDT
2,4-二氯苯胺 2,4-Dichloroaniline
2,4-二羟基苯甲醛 2,4-Dihydroxybenzaldehyde;2,4-Dihydroxybenzene carbonal
2,4-二甲基喹啉;4-甲基喹哪啶 2,4-DiMethylquinoline;4-Methylquinaldine
2,5-二甲基环己醇;1-羟基-2,5-二甲基环己烷;六氢对二甲苯酚 2,5-DiMethylcyclohexanol;1-Hydroxy-2,5-diMethylcyclohexane;Hexahydro-p-xylenol
2,5-二甲基-2,5-己二醇 2,5-DiMethylhexane-2,5-diol;2,5-DiMethyl-2,5-hexanediol
2,6-二氨基甲苯;2,6-甲苯二胺; 2,6-二胺; 2-甲基-1,3-苯二胺 2,6-DiaMinotoluene;2-Methyl-1,3-phenylenediaMine;2,6-ToluenediaMine;2,6-TolylenediaMine;1,3-DiaMino-2-Methylbenzene;2-Methyl-1,3-benzenediaMine;
2,6-二氯苯胺 2,6-Dichloroaniline
2,6-二氯吡啶;邻二氯吡啶;2,6-二氯氮苯 2,6-Dichloropyridine
2,6-二甲基-4-庚醇;二异丁基甲醇 2,6-DiMethyl-4-heptanol;4-Hydroxy-2,6-diMethylheptane
2,6-二甲基-4-庚酮;二异丁基酮;二异丙基丙酮;二异丁基甲酮 2,6-DiMethyl-4-
人阿拉伯半乳糖蛋白 48T
Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白 48T
Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit 人β连环蛋白/联蛋白 48T
Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP ELISA Kit 人淀粉样前体蛋白 48T
Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白 48T
Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白 48T
Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸 48T
Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 48T
Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 人脑红蛋白 48T
Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的牛血清白蛋白残留检测 48T
Human amyloid beta peptide 1-40,A Beta1-40 ELISA Kit 人β淀粉样蛋白1-40 48T
Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂碱性蛋白 48T
Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 人高迁移率族蛋白B1 48T
Human desmin,Des ELISA Kit 人结蛋白 48T
Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白 48T
Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 人S100B蛋白 48T
Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 人巨噬细胞炎性蛋白2 48T
Human gelson ELISA Kit 人凝胶原蛋白 48T
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次使用说明书Human talin ELISA Kit 人踝蛋白 48T
Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化细胞内分泌因子 48T
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 48T
Human ALR ELISA Kit 人肝再生增强因子 96T
Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人转录因子Tbx3 ELISA试剂盒 96T
human HMGB-1 ELISA Kit 人高迁移率族蛋白B1 ELISA Kit 96T
GATA4 ELISA Kit muman 人GATA结合蛋白4 ELISA试剂盒 96T
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)