Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml) 碘化丙啶染液(1mg/ml)产品描述
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基之间实现与DNA结合。这种结合没有或者几乎无序列倾向性,大约每4-5个DNA碱基对结合一个染料。PI也能与RNA结合,需要用核酸酶处理来区分DNA和RNA染色。水溶液中PI的ZD激发/发射波长是493/636nm。一旦与核酸结合,荧光信号明显增强20-30倍,ZD激发波长向红色波段迁移~30-40nm,ZD发射波长向蓝色波段迁移~15nm,从而使其ZD激发/发射波长变为535/617nm。PI的摩尔吸光系数相对比较低,但是其具有足够大的斯托克司频移来同时检测核酸DNA和荧光标记抗体,只需要使恰当的滤片。PI适用于荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪以及荧光计分析。
PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。
本品是溶于水的PI储存液,浓度为1mg/ml,只需用合适的缓冲液稀释到工作液即可。
Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml) 碘化丙啶染液(1mg/ml)产品性质
英文同义名(English synonym)
2,7-Diamino-9-phenyl-10 (diethylaminopropyl)-phenanthridium iodide methiodide.
CAS号(CAS NO.)
25535-16-4
分子式(Formula)
C27H34I2N4
分子量(Molecular Weight)
668.4
纯度(Purity)
≥95% by HPLC
溶解性(Solubility)
溶于水(1mg/ml)
荧光光谱 (Fluorescence Spectral)
水溶液,PI的Ex/Em= 493/636nm;PI-核酸的Ex/Em= 535/617nm;荧光可用氙气灯,泵弧灯或者488nm氩离子激光激发。通常情况下,用流式细胞仪的FL2通道检测。
结构式(Structure)
Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml) 碘化丙啶染液(1mg/ml)运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。4 ºC避光保存,至少6个月稳定。
使用方法
1. 贴壁细胞复染步骤(荧光显微镜检测)
1) 样本准备:根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。PI染色一般在其它染色完成后再进行。PI复染要求细胞经透化处理。
2) RNase酶处理:若样本使用多聚甲醛,甲醛或者戊二醛固定,则需要进行RNase处理。若样本用甲醇/醋酸或者丙酮固定,通常不需要此步操作。a,于2×SSC (0.3 M NaCl, 0.03 M sodium citrate, pH 7.0)溶液平衡样本;b,将本品置于含有100µg/mL DNase-free RNase的2×SSC溶液中37°C孵育20min;c,用2×SSC溶液清洗样本3次,每次1min。
3) 复染:a,于2X SSC (0.3 M NaCl, 0.03 M sodium citrate, pH 7.0)溶液平衡样本;b,直接用2×SSC稀释1mg/ml(1.5 mM)PI储存液 1:3000,得到500 nM的PI工作液。通常添加300µL染液足够用于一个盖玻片细胞制片。染色1-5min。c,2×SSC清洗几次,流尽多余的缓冲液后,加入抗淬灭剂封片(比如Yeasen,货号:36308ES08)。d,选择荧光显微镜的合适滤片进行观察。
2. 悬浮细胞复染步骤(流式细胞仪检测)
1) 样本准备:根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。或者使用如下的步骤:
a, 收集一定量的细胞,密度约 2 × 105 ~1 × 106。离心收集细胞,吸掉上清液,用手轻弹管壁就剩下
的液体重悬细胞。之后加入1ml常温存放的PBS;
b,将所有的重悬细胞转移到4ml于-20ºC预冷的无水乙醇,在高速涡旋混匀的同时一边用枪缓慢的添
加细胞悬液到乙醇内。于-20ºC乙醇中固定5-15min。
c, 离心收集细胞,除去乙醇。用手轻弹管壁以弹松细胞后,加入5ml室温的PBS。允许细胞水化15min;
2) 复染
a, 用染色液(100 mM Tris, pH 7.4, 150 mM NaCl, 1 mM CaCl2 , 0.5 mM MgCl2 , 0.1% Nonidet® P-40)稀
释1mg/ml(1.5 mM)PI储存液 1:500,得到3 µM的PI工作液。1ml的PI染色液足够用于每个细胞样本的检测。注:工作液的使用浓度可以根据自身实验体系调整,也可以直接使用PBS,HBSS等缓冲液直接稀释PI储存液到需要的浓度。
b,样本制备的ZH一步后离心收集细胞,去除上清,用手轻弹管壁以弹松细胞后,加入1ml的PI染
色工作液。室温孵育15min后,流式细胞仪进行细胞分析。若用流式显微镜观察,则需要离心样本,去除上清并重悬细胞在新鲜的缓冲液中。吸取1滴悬液到载玻片上,盖上盖玻片后观察。
3. 染色质FISH复染步骤
1) 样本准备:根据标准步骤制备样本。复染之前的ZH一步用去离子水清洗样本以去除玻片上残留的缓冲盐。室温晾干。此步骤有助于减少非特异性的背景染色。
2) 复染
a,工作液的配制:用PBS缓冲液直接稀释1 mg/ml(1.5 mM)的PI储存液1:1000,得到1.5 µM的
PI染色工作液。滴加300µL的工作液直接到样本。有必要的话,工作液内加入新鲜制备的RNase A(终浓度:10 µg/mL)。可使用塑料盖玻片均匀分布染液在载玻片上。室温避光条件下孵育样本30 min;如果加入RNase则37ºC孵育。
b. 去除盖玻片,用PBS或去离子水清洗以除去没有结合的染料;
c. 用吸水纸巾围绕着样本周围吸取残留液体,盖上玻璃盖玻片后用石蜡或者指甲油封住盖玻片边缘。也可用抗荧光淬灭剂进行封片。
d. 选择荧光显微镜的合适滤片进行观察。
注意事项
1) 碘化丙啶(PI)是已知的诱变剂,因此PI溶液在丢弃之前需要先经过活性炭处理。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml) 碘化丙啶染液(1mg/ml)yb-axbz-173 猪肾细胞系 IBRS-2 规格25毫升/株.
yb-axbz-174 草鱼肾细胞系 GIK 规格25毫升/株.
yb-axbz-175 昆虫细胞系 Sf-21 规格25毫升/株.
yb-axbz-176 昆虫细胞系 SF-9 规格25毫升/株.
yb-axbz-177 草鱼肝脏细胞 L8824 规格25毫升/株.
yb-axbz-178 草鱼肾脏细胞 CIK 规格25毫升/株.
yb-axbz-179 团头鲂尾鳍细胞 WCF 规格25毫升/株.
yb-axbz-180 白鲢尾鳍细胞 SCF 规格25毫升/株.
yb-axbz-181 散鳞镜鲤尾鳍细胞 规格25毫升/株.
yb-axbz-182 鲤鱼尾鳍细胞 规格25毫升/株.
yb-axbz-183 转化的豚鼠胎体细胞 104C1 规格25毫升/株.
yb-axbz-184 ZG仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型) CHO/dhFr- 规格25毫升/株.
yb-axbz-185 大鼠乳腺腺癌细胞系 MADB106 规格25毫升/株.
yb-axbz-186 鼠肉瘤细胞 S-180-S2D9 规格25毫升/株.
yb-axbz-187 鼠肝癌细胞 H22-H8D8 规格25毫升/株.
yb-axbz-188 鼠腹水瘤 EAC-E2G8 规格25毫升/株.
yb-axbz-189 小鼠淋巴瘤 EL-4 规格25毫升/株.
yb-axbz-190 鳞癌VX-2(兔模型) 规格25毫升/株.
yb-axbz-191 鲑鱼胚胎细胞 CHSE 规格25毫升/株.
yb-axbz-192 鲑鱼胚胎细胞 RTG 规格25毫升/株.
yb-axbz-193 大黄鱼肾细胞 PCK 规格25毫升/株.
yb-axbz-194 鼠腹水单核细胞瘤 J774A.1 规格25毫升/株.
yb-axbz-195 小鼠IL-3依赖性32D细胞 规格25毫升/株.
yb-axbz-196 大黄鱼EPC细胞 EPC 规格25毫升/株.
yb-axbz-197 菜青虫卵巢细胞 Pr-HNV8 规格25毫升/株.
yb-axbz-198 大鼠胰岛素细胞 INS-1 规格25毫升/株.
yb-axbz-199 小鼠淋巴结血管上皮样细胞 SVEC4-10 规格25毫升/株.
yb-axbz-200 小鼠肉瘤 S37 规格25毫升/株.
yb-axbz-201 小鼠乳腺 EMT6 规格25毫升/株.
yb-axbz-202 C3H小鼠骨肉瘤 LM8 规格25毫升/株.
yb-axbz-203 大鼠骨肉瘤 VMR106 规格25毫升/株.
yb-axbz-204 猴肾C M145 规格25毫升/株.
yb-axbz-205 兔成骨C IF 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
yb-axbz-206 小鼠白血病 L1210 规格25毫升/株.
yb-axbz-207 大鼠皮层神经元细胞 RN-c 规格25毫升/株.
yb-axbz-208 大鼠主动脉平滑肌细胞 RSMC 规格25毫升/株.
yb-axbz-209 小鼠小胶质瘤细胞 Bv-2 规格25毫升/株.
yb-axbz-210 鼠杂交瘤细胞 K6H6/B5 规格25毫升/株.
yb-axbz-211 大鼠脑膜细胞 RMC 规格25毫升/株.
yb-axbz-212 转基因细胞 3T3/Fas/com 规格25毫升/株.
yb-axbz-213 大鼠肝癌细胞 CRL-1548 规格25毫升/株.
yb-axbz-214 小鼠T淋巴细胞瘤细胞 Cyc-Tag(S49) 规格25毫升/株.
yb-axbz-215 小鼠细胞 FDC-P1 规格25毫升/株.
yb-axbz-216 小鼠垂体瘤细胞 GT1-1 规格25毫升/株.
yb-axbz-217 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞 NG108-15 规格25毫升/株.
yb-axbz-218 小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3) PA12 规格25毫升/株.
yb-axbz-219 小鼠血细胞 WEHI-3 规格25毫升/株.
yb-axbz-220 小鼠红白血病细胞 MEL 规格25毫升/株.
yb-axbz-221 兔主动脉平滑肌细胞 SMC 规格25毫升/株.
yb-axbz-222 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素) AtT-20 规格25毫升/株.
yb-axbz-223 小鼠瘤细胞 Fox-NY 规格25毫升/株.
yb-axbz-224 兔主动脉平滑肌细胞 CCC-SMC-1 规格25毫升/株.