| 货号 | 11300 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 500 Tests | 价格 | 2460 |
| Ex (nm) | 570 | Em (nm) | 583 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的葡萄糖检测的试剂盒，葡萄糖氧化酶是二聚体蛋白质，其催化β-D-葡萄糖氧化成过氧化氢和D-葡糖酸-1,5-内酯，其被水解成葡萄糖酸。它广泛用于测定体液中的葡萄糖以及从饮料，食品和其他农产品中去除残留的葡萄糖和氧气。此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物传感器中以检测葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶检测试剂盒为溶液中葡萄糖氧化酶的测量提供了一种快速而灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。该套件使用我们的Amplite Red基板，可实现双重可录制模式。荧光信号可以通过荧光酶标仪或吸光度酶标仪轻松读取。使用Amplite 荧光葡萄糖氧化酶检测试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至0.05 mU / mL的葡萄糖氧化酶。百萤生物是AAT Bioquest的ZG代理商，为您提供质的Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒。
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样品实验方案
简要概述
1.准备GO工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶标准品或测试样品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液（250X）：
将100μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）存在下，Amplite Red不稳定。反应中DTT的浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液（pH 7.4）。
2. HRP库存解决方案（50X）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。
3.葡萄糖氧化酶标准溶液（100 U / mL）：
将1mL测定缓冲液加入葡萄糖氧化酶小瓶（组分D）中。
4.葡萄糖原液（10X）：
将5mL测定缓冲液加入葡萄糖小瓶（组分F）中。
2.标准溶液
葡萄糖氧化酶标准
通过将2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶标准溶液稀释到200μL的测定缓冲液（组分B）中来制备葡萄糖氧化酶标准品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液。 然后取10μL1000mU/ mL葡萄糖氧化酶标准溶液，进行1：100稀释，得到10mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液（GOS7）。然后进行1：3连续稀释以获得剩余的连续稀释的葡萄糖氧化酶标准品（GOS6-GOS1）。包括非葡萄糖氧化酶缓冲液作为空白对照。 的葡萄糖氧化酶浓度应低两倍（即0至5mU / mL）。注意：高浓度的葡萄糖氧化酶可能会因Amplite Red（非荧光产物）的过氧化而导致荧光信号降低。
3.工作溶液
将20μLDelterite Red储备液（250X），100μLHRP储备液（50X）和500μL葡萄糖储备液（10X）加入4.3 mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为5 mL葡萄糖氧化酶（GO）工作溶液。 避光。
样品分析
表1.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖氧化酶标准品和测试样品的布局。 GOS =葡萄糖氧化酶标准品（GOS1-GOS7,0.01至10mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| GOS1 | GOS1 | ... | ... |
| GOS2 | GOS2 | ... | ... |
| GOS3 | GOS3 | ||
| GOS4 | GOS4 | ||
| GOS5 | GOS5 | ||
| GOS6 | GOS6 | ||
| GOS7 | GOS7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| GOS1-GOS7 | 50ul | 连续稀释（0.01至10 miU / mL） |
| BL | 50ul | 分析缓冲液（组分B） |
| TS | 50ul | 样品 |
1.根据表1和表2中提供的布局制备葡萄糖氧化酶标准品（GOS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。
2.在葡萄糖氧化酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液，使总葡萄糖氧化酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLGO工作溶液，总体积为50μL/孔。
3.将反应在37°C孵育10至30分钟，避光。
4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（Ex / Em = 540 / 590nm）监测荧光强度。 注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 然而，与荧光读数相比，吸收检测具有更低的灵敏度。
