荧光素酶报告载体构建及检测

荧光素酶检测   康颜生物提供报告基因检测服务，采用荧光素酶报告基因检测系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，然后可以通过荧光测定仪 (luminometer)测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，荧光闪烁总数与样品中存在荧光素酶的活性成正比。
荧光素酶报告基因检测系统：
1. 启动子研究
动物：pcDNA3.1，pGL3/pGL3-basic。
植物：pGreenII 62-SK，pGreen II-0800-LUC。
2. miRNA研究
动物：pSilencer 4.1-CMV neo， pMIR-REPORTER Luciferase。
服务内容：
1. 研究目的基因（转录因子或miRNA）对下游靶基因的转录激活或YZ；
2. 外源物质对目的基因的表达影响。
实验步骤：
1. 分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点或miRNA的靶基因。
2. 构建载体质粒，大量抽提、纯化。
3. 转染细胞或使用农杆菌侵染烟草。
4. 提取蛋白、测定荧光素酶的活性。
实验周期与价格：

项目名称	项目说明	单价	周期
载体构建	1500bp以下	800元/载体	1-2周
	1500-2500bp	1800元/载体
	2500-3500bp	3000元/载体	2-3周
动物细胞 荧光素酶检测	无内毒素质粒抽提	300元/质粒	3天
	细胞脂质体转染	300元/质粒/样本	1-2周
	测定Luciferase的酶活	120元/孔	1-2天
植物细胞 荧光素酶检测	农杆菌转化	200元/质粒	1周
	烟草培养转化	400元/样品	4周
	测定Luciferase的酶活	200元/孔	1-2天

提交的产品和资料：
构建好的质粒，实验原始数据，结果分析报告。