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CCK8细胞毒性检测

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    免疫荧光,激光共聚焦,病毒包装,MTT, Transwell 等单项实验服务,并有能力承接肿瘤,神经等方面的实验课题,帮助客户完成实验构思,操作及英文文章润笔等专项服务
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     CCK8实验步骤
    1. 将对数生长期的细胞,用0.25%胰蛋白酶消化单细胞,重悬于新鲜生长培养液中
    2. 细胞2×103—2×104/well(即2×104—2×105/ml)接种于96孔培养板,100ul/well。
    3. 置37℃,5% CO2培养箱中培养过夜;
    4. 根据实验设计,处理96孔板中的细胞,继续置37℃,5% CO2培养箱中培养
    设空白对照(仅含培养液)
    设阴性对照(细胞、培养液、不含药物);
    5. 药物处理时间到后,直接于每孔中加入CCK8溶液(10μl/well),37℃孵育2-4h
    6. 小心吸出孔中的培养液后,再加入100μl/well的DMSO,100μl/孔
    7. 室温静置至沉淀完全溶解(约10min)
    8. 用酶标仪经行双波长(检测波长570nm,参考波长630nm)检测各孔OD值。
    9. 结果分析
    1) 取复孔平均值,各孔OD值为:(OD570nm-OD630nm)—(OD570nm-OD630nm空白孔
    2)   细胞死亡率计算:
            各孔细胞死亡率=(OD阴性对照孔—OD处理孔)/ OD阴性对照孔×
            各孔细胞存活率=  OD处理孔/ OD阴性对照孔×
     
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