酵母双杂交筛选 蛋白质相互作用服务

 酵母双杂交筛选
    采用自主开发的高通量、标准化的酵母双杂交技术，凭借多年来积累的丰富经验，提供优质的酵母双杂交文库筛选科研服务。目前提供人正常肝脏文库的筛选服务，也可根据客户需要提供其它文库的酵母双杂交筛选。此外还开展阵列法酵母双杂交筛选技术服务，现有表达人类5000个基因的阵列，可以更灵活GX的提供蛋白质相互作用分析。是您研究基因功能的基础，为拓展研究思路指明方向。

 

 

载体构建

一 原核表达质粒：

构建带有GST和His标签的原核表达质粒，可用于抗原制备、体外蛋白质－蛋白质相互作用（如pull down）等需要原核表达蛋白的实验。

二 真核表达质粒：

构建带有Myc、His、Flag、HA、GFP、RFP等标签的真核表达载体，用于瞬时转染或稳定株的筛选、哺乳动物细胞内的表达及细胞内定位研究。（注：可同时提供质粒表达的鉴定。时间—2周。）

 

A）Analysis of the subcellular localization of Flag-Smurf1 and GFP-CKIP-1, which were individually expressed in HEK293T cells by confocal microscopy. Scale bar, 10 μm.

 

 

  (B) CKIP-1 (green) colocalized with Smurf1 (red) at the plasma membrane. GFP-CKIP-1 and Flag-Smurf1 were cotransfected into COS7 cells and stained 24 hours later with an anti-Flag antibody before visualization by confocal microscopy. Scale bar, 10 μm. （NCB 2005）

 

 

RNAi序列的设计及鉴定

   可根据需要设计目的基因的RNAi序列，构建目的基因的RNAi载体或提供相关的siRNA序列，并对RNAi序列的有效性进行检测，给出有效的RNAi序列。RNAi载体可用于将其稳定整合于细胞基因组，得到目的基因敲低的细胞系。（注：时间—4周。）

稳定株的筛选

可提供两株以上目的基因稳定表达或敲低的细胞系，同时提供对照细胞系。（注：时间—6周。）

蛋白的表达与纯化

   适用范围：原核上清表达蛋白；提供量：1-2 mg；交货时间—3周。

转录因子活性的检测

可通过报告基因实验检测雌激素受体、p53、AP-1、NF-κB等转录因子的活性。（注：时间—2-4周。）

 

 

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