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RBE人肝胆管癌细胞 |RBE细胞

产品信息
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     上海素冉生物科技有限公司是一批由美国留学归来的致力于服务ZG生物领域的青年创办的一家新型公司。公司自创办以来,以优质的产品、快捷的速度和完善的售后服务,赢得生物界老师的厚爱,您选择素冉的理由: 产品齐全:囊括实验室仪器、设备、实验室耗材、免疫生物学试剂、动物生物学试剂、植物生物学试剂、微生物学试剂、细胞生物学试剂、遗传学生物试剂、生物化学试剂、分子生物学试剂。 品Pai齐全:囊括国内外100多个知名品Pai。 方便、快捷订货周期短,选择服务质量好的快递,全称跟踪,及时到达您的手中。素冉生物努力打造生物领域内的京东商城。 平价:同等质量的产品,我们这里价格实惠,为您节省每一分钱。 优质的售后服务:实验过程,我们有技术全程跟踪指导,若有问题,我们时间为您处理,保证您售后无忧。 多姿多彩的技术服务:免疫学技术服务、Western Blotting技术服务、实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务、病理学检测技术服务等。 总之,素冉生物是您值得信赖的地方:诚实正直,以客户的切身利益为出发点,关注客户,协助客户一起成长!

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    细胞名称RBE人肝胆管癌细胞 |RBE细胞
    RBE人肝胆管癌细胞 【已通过STR鉴定】
    细胞来源:ATCC CRL-1435
    代次:P3
    规格:T25
    细胞数:1x10^6 cells
    组织来源:前列腺;骨腺癌转移灶
    RBE人肝胆管癌细胞 【已通过STR鉴定】
    生长特性:贴壁生长
    形态特征:上皮细胞
    微生物及支原体检测:阴性
    安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下(Z好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
    (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
    (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
    1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。
               
    注意事项:
    1、观察细胞Z好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
    2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
    3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

    →液氮槽长期储存。
    冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
    迄今为止,公司收录背景资料清晰,细胞活力状态良好的细胞株1420株,其中绝大部分是近年来从美国ATCC和NIH分批引进的细胞种子,少部分来自全国各地细胞研究所,细胞来源可靠,细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时Z常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。

    做细胞实验的同学看过来。原装ATCC细胞现货来啦。 
    选择上海素冉生物细胞3个理由:
    1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;
    2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;
    3、使用我司推荐的进口品Pai血清进行培养实验,效果更佳。
     

    专业技术人员李工收藏的细胞培养小技巧:
    1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
    2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天蕞好更换一次培养基。
    3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
    4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
    5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。


    细胞培养常见问题及解决方法
    问题 原因 解决方案
    细胞生长缓慢 生长培养基使用不当 按照生产商的建议,使用相应的预热生长培养基。
    生长培养基中血清质量差 使用其他批次血清。
    传代操作不当 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。
    换液过于频繁 降低换液频率,参考生产商推荐的换液频率。
    细胞传代次数过多 使用传代次数较少的健康细胞。
    细胞生长超过汇合状态 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行,建议细胞密度达 80-90%传代。
    细胞被支原体污染 将细胞、培养基和试剂丢弃;新取一只冻存细胞,并且使用新的培养基和试剂。
    细胞复苏存活率低 细胞冻存不当 新取一只冻存细胞,并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中,直至复苏。
    自行制备的冻存细胞无活性 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。
    制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。
    严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。
    新取一只冻存细胞。
    细胞复苏方法不当 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程,只能作为指导原则使用。
    确保冷冻细胞解冻迅速,接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。
    复苏培养基使用不当 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。
    细胞稀释过度 按照生产商的建议,将解冻后的细胞高密度接种,以改善复苏效果。
    处理细胞时动作不够轻柔 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。
    冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 如果未避光储存,冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质;新取一只冻存保护剂,重新冻存细胞。

     ★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料直接call,对您造成的不便还请见谅!
     ★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
           收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
    ,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么Z可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。


     
    温馨提示:不可用于临床ZL。

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