本产品为胰蛋白酶消化液。胰蛋白酶含量为0.25%,不含EDTA。经无菌过滤,可直接使用。
操作说明:1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,室温放置30分钟或者更长时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。切忌避免过度消化。
d) 如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶消化液重新消化。但应尽量避免二次消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,加入适量的培养基重悬细胞。1000-2000rmp/min离心5分钟,沉淀细胞,尽量去除胰蛋白酶消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:消化细胞时应及时观察,掌握好时间避免消化过度和二次消化。
温馨提示:不可用于临床ZL。