免疫印迹技术服务

免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测，可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。

 
WB技术服务流程：
◎ 细胞及组织蛋白质抽提；
◎ 蛋白质定量；
◎ 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)；
◎ 蛋白质转膜；
◎ 膜的封闭；
◎ 一抗、二抗孵育；
◎ 结果检测：化学发光法检测，X 胶片曝光显影；
◎ 数据分析；提供标本后20-30个工作日之内提交实验结果，实验结果以数据和图片的形式提交给客户。
 
WB样品准备：
悬浮细胞：
® 约1×107个细胞，低速离心收集，弃去培养液，加入2－5 ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入- 70°C冰箱保存。干冰运输。
贴壁细胞：
® 约1 × 107个贴壁细胞，胰酶消化后加入PBS悬浮细胞，低速离心收集，弃去液体，加入2－5 ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入- 70°C冰箱保存。干冰运输。
组织：
® 采集新鲜组织（注意：生物体死亡后10分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入液氮或- 70°C冰箱中保存，干冰运输。
注：
1、本市内细胞样品也可以直接常温运送，运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口，然而某些实验条件中包含时间限制，建议冻存后运输。
2、所使用的1.5 ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌，装好样品后管口需要以封口膜封好。
3、快递运输所用干冰量至少为8公斤，且运输用泡沫箱需用封箱带密封。