A-375人恶性黑色素瘤细胞 含STR鉴定

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株，其中人的已通过STR鉴定的有几百株，欢迎各位选购。。。。。。
产品名称：A-375人恶性黑色素瘤细胞 含STR鉴定
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点：细胞代数为4代以内，细胞耐药倍数8倍以上；
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！
注：耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法基本一致，只是在培养中会加药维持筛选压力

• A-375人恶性黑色素瘤细胞 含STR鉴定
• 三、细胞生长条件：

 

细胞系特征
培养条件：		完全培养基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清 GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%
传代方法：		收到细胞后，在倒置镜下(Z好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，低速离心，打开细胞培养瓶，吸出培养液（注意不要吸出细胞），换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 低速离心，弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中（补加完全培养基至8到10ml）。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。 注：1、观察细胞Z好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。
冻存方法：	冻存液：90%胎牛血清，10%DMSO   储存：液氮储存

收到细胞后应如何去正确的处理：
   您需要准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂，虽然所有的贴壁，半贴壁或者悬浮细胞处理方式差不多，但是不同的实验室培养条件和处理力度还有试剂的批间差这些问题存在，也会导致对细胞处理不当，或者环境的不适应而造成细胞的死亡。
       1.收到细胞，时间要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。
       2.当通过上一步的观察，细胞初步没有任何问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，必须恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。
       3.如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，保证每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。
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