犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒 厂家

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本试剂盒仅供研究使用。
使用目的：
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。

 犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素（NT-ProBNP）ELISA试剂盒 厂家 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
 犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素（NT-ProBNP）ELISA试剂盒 厂家  试剂盒组成

 犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素（NT-ProBNP）ELISA试剂盒 厂家  标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素（NT-ProBNP）ELISA试剂盒 厂家 操作程序：

① 加抗体包被 → 4℃过ye，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值

 犬氨基端前脑钠素,犬氨基端前脑钠素（NT-ProBNP）ELISA试剂盒 厂家 显色的重要性

显色是ELISA中的一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间，及时判断。

OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值ZG。OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。

TMB受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后，约40分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2小时后即可完全消退至无色。TMB的终止液有多种，叠氮钠和SDS等酶YZ剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。

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