TG1 化学感受态细胞0.1mL×10_详细资料

产品信息

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10存放时间不能超过该温度下的Z长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到的温度。

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜

使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。

2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。

3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。

TG1 化学感受态细胞0.1mL×105. 制备细胞裂解物：

1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片

以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。

2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。

11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。

1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。

2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。

3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。
TG1 化学感受态细胞0.1mL×10产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由大肠杆菌 K12 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗

体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。

本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：

1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。

2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。

3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。

4. 本介质可以反复使用多次。

人钙蛋白酶YZ蛋白(CAST)ELISA KitHuman CAST ELISA kit

人钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA KitHuman ACAST-DⅣ ELISA Kit

人钙蛋白酶2(M/II)大亚基(CAPN2)(CAPN2)ELISA KitHuman CAPN2 ELISA kit

人钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA KitHuman CAMK 2 ELISA Kit

人富组蛋白(histatin-5)ELISA KitHuman histatin 5 ELISA Kit

人富组氨酸糖蛋白(HRG)ELISA KitHuman histidine-rich glycoprotein,HRG ELISA kit

人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA KitHuman leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,LRG1 ELISA Kit

人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)ELISA KitHuman Cyr61/CCN1 ELISA Kit

人副肿瘤性天疱疮(PNP)抗体ELISA KitHuman PNP antibody ELISA kit

人复制蛋白A(RPA-70)ELISA KitHuman RPA-70 ELISA Kit

人附睾蛋白4(HE4)ELISA KitHuman HE4 ELISA kit

人辅酶Q10(CoQ10)ELISA KitHuman Coenzyme Q10,CoQ10 ELISA Kit

人脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA KitHuman PEPD ELISA Kit

人脯氨酸羟化酶(PHD)ELISA KitHuman PHD ELISA Kit

人脯氨酸/谷氨酰铵富含性剪接因子(SFPQ)ELISA KitHuman SFPQ ELISA Kit

人封闭蛋白4(CLDN4)ELISA KitHuman CLDN4 ELISA Kit

人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)ELISA KitHuman SFRP5 ELISA Kit

人分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)ELISA KitHuman SFRP4 ELISA Kit

人分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)ELISA KitHuman SFRP2 ELISA Kit

人分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA KitHuman SFRP1 ELISA Kit

人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)ELISA KitHuman CHGB/SCG1 ELISA kit

人肺炎衣原体抗原(Cpn)ELISA KitHuman chlamydia pneumoniae,Cpn ELISA Kit

人肺炎衣原体抗体IgM(Cpn-IgM)ELISA KitHuman Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-IgM ELISA Kit

人肺炎衣原体抗体IgA(Cpn-IgA)ELISA KitHuman Cpn-IgA ELISA Kit

人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA KitHuman Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-Ab ELISA Kit

人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)ELISA KitHuman Chlamydia pneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISA Kit

人肺特异性X蛋白(LUNX)ELISA KitHuman LUNX ELISA Kit

人肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA KitHuman SP-D ELISA Kit

人腓骨蛋白2(FBLN2)ELISA KitHuman Fibulin-2,FBLN2 ELISA kit

人肥胖YZ素(Obestatin)ELISA KitHuman Obestatin ELISA kit

人肥大细胞类胰凝乳蛋白酶ELISA KitHuman Mast Cell Chymase ELISA Kit

人肥大细胞类羧肽酶ELISA KitHuman Mast Cell Carboxypeptidase ELISA Kit

人非小细胞肺癌相关抗原211(CA211)ELISA KitHuman cyfra211,CA211 ELISA kit

人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA KitHuman nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit

人防御素 ELISA KitHuman defensins ELISA Kit

人芳香烃受体(AhR)ELISA KitHuman AhR ELISA Kit

人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA KitHuman E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit

人泛素蛋白(Ub)ELISA KitHuman ubiquitin,Ub ELISA Kit

人反三碘甲状腺原氨酸(rT3)ELISA KitHuman ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA Kit

人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA KitHuman farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 ELISA Kit

人法尼醇X受体(FXR)ELISA KitHuman farnesoid X receptor,FXR ELISA Kit

TG1 化学感受态细胞0.1mL×10人二酰基甘油(DAG/DG)ELISA KitHuman diacyl glycerol,DAG/DG ELISA Kit

人二氢嘧啶脱氢酶[NADP+](DPYD)ELISA KitHuman Dihydropyrimidine dehydrogenase[NADP+](DPYD)ELISA kit

人二羟基赖正己氨酸(DHLNL)ELISA KitHurman dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit

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人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA KitHuman Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit

人多功能蛋白聚糖(versican)ELISA Kithuman versican/PG-M/PG-350 ELISA kit

人多巴铵脱羧酶(DDC)ELISA KitHuman dopamine decarboxylase,DDC ELISA Kit

人多巴铵-β羟化酶(DBH)ELISA KitHuman dopamine-β-hydroxylase,DBH ELISA Kit

人对氧磷酶-3(PON3)ELISA KitHuman Paraoxonase 3,PON3 ELISA Kit

人对氧磷酶(PON)ELISA KitHuman paraoxonase,PON ELISA Kit

人对称二甲基精氨酸(SMDA)ELISA KitHuman Symmetric dimethylarginine(SMDA)ELISA Kit

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