一步法(快速/无缝)克隆试剂盒批发

名称：一步法(快速/无缝)克隆试剂盒批发
产地：国产|进口
规格：25T
编号：SY0279
英文名：One Step Pcr Cloning Kit
一步法（快速/无缝）克隆试剂盒是一款简单、快速、GX的DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点，可GX克隆50 bp～10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’Z末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase，Exnase中添加了独特的重组增强因子，显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现GX克隆 (100 cfu/ng Vector)，而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

一步法（快速/无缝）克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。

产品组份：
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定。


图一 实验流程概览

注：插入片段PCR扩增时，引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记)，使得扩增产物5’和3’Z末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。

除一步法(快速/无缝)克隆试剂盒批发外，我公司正在打折促销以下产品：

·GAS-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0084
英文名称：GAS luciferase reporter plasmid
规格：1μg
GAS荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（GAS luciferase reporter plasimd）是用于检测GAS转录活性水平为目的的报告基因。GAS(gamma-activated sequence,GAS) 又称γ干扰素活化序列在皮肤发生迟发型接触性过敏时，可与转位至角朊细胞核内的STAT-91结合而激活K17的表达。

GAS报告基因主要用于检测细胞中干扰素调控的信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMGAS-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个GAS结合位点，可以高灵敏度地检测GAS的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得GAS报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMGAS-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。


一步法(快速/无缝)克隆试剂盒批发