使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400（一）

引言

实验
样品制备

样品按照Oasis® MCX的标准操作流程进行萃取。简单来说，在0.5mL兔血浆中加入0.5mL 4% H3PO4进行酸化。（注意：本研究中采用的是0.5mL血浆，采用更小剂量亦可）。MCX96孔板在经过1.0mL MeOH和1.0mL H2O活化平衡之后，经酸化的样品被上样到填料中．上样后，使用1.0mL 2%甲酸和2×1.0 mL MeOH清洗。样品使用2×250μL含5%NH4OH的MeOH溶液进行洗脱。 “后加标”（PS）样品是在空白兔血浆洗脱液中加入标准品或标准品与PEG 400的混合物。经萃取的样品则以以下方式制备：在未经萃取的血浆中加入200ng/mL标准品、或在其基础上再加入5 mg/mL PEG 400。

PEG去除的回收率依据以下算式得出：% 回收率 =（萃取样品峰面积/后加标样品峰面积）×100%  为进行PEG去除的相关分析，样品按照1:200的比例在流动相中进行稀释，以避免高浓度PEG400给质谱仪带来的污染。

方法条件
SPE条件
液相色谱条件
检测：沃特世ACQUITY®SQD
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm，2.1 x 50 mm，部件号：186002350
样品温度：10摄氏度
流速： 0.5 mL/min.
流动相B （MPB）：0.1% HCOOH乙腈

初始流动相条件为95:5 MPA:MPB。持续0.5分钟，MPB在2.5分钟之后增至90%。MPB比例随后降回5%，并持续2分钟，重新平衡色谱柱。总运行时间5.0分钟。

质谱条件
电离模式： （+） ESI
毛细管电压：2.5 kV
脱溶剂气体：700 L/min