生物素酰化探针的制备实验——随即寡核苷酸引物合成法

DNA

dNTP生物素klenow酶TEEDTALiCl乙醇

离心机培养箱

1.  在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg 模板DNA，加水至总体积为34 μl。
2.  在沸水中变性DNA 5 min 置于冰浴5 min，稍加旋离。
3.  按顺序加入下列溶液：

4.  加入3 μl 0.5 mol/l EDTA pH8.0以终止反应。加入5 μl 4 mol/l LiCl和150 μl 冰冷的无水乙醇，置于冰浴30 min。
5.  室温高速离心10 min，沉淀用70%乙醇洗涤。

6.  DNA用20 μl pH7.5的TE缓冲液重悬。用比色法或化学发光法估价生物素酰化反应的效果。