本方案介绍的是利用寡核苷酸对于硅胶反相亲和的特性，将放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物分离的方法，本方案的方法只可用于纯化 5'端放射性标记或非标记的含磷酸基团的寡核苷酸，而方案 1 所介绍的方法多用于 5'末端为游离羟基的寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。
乙腈碳酸氢铵TE 溶液放射性标记寡核苷酸
离心干燥机微量离心管放于管架或收集器Sep-Pak 经典层析柱注射器
材料溶液和缓冲液毎个 Sep-Pak C18 柱用 10 ml 髙效液相（HPLC) 级乙腈（100%), 使用前用水稀释乙腈。碳酸氢铵（25 mmol/L,pH8.0)含 5%(WV) 乙腈的碳酸氢铵（25 mmol/L，pH8.0)用于收集层析柱纯化的放射性标记寡核苷酸洗脱液Sep-Pak 经典层析柱，短柱身10 ml 25 mmol/L 碳酸氧铵/5% 乙腈10 ml 5% 乙腈4.3 份 lml30% 乙腈洗脱放射性标记的寡核苷酸，用 1.5 ml 微量离心管分别收集每个组分，每次洗脱后重复步骤 lc。
