| 实验步骤 | 材料
溶液和缓冲液
任选，见步驟 7。
EDTA(0.5mol/L,pH8.0)
乙醇
酚：氯仿
任选，见步驟 7。
TE(pH7.6)
Tris-Cl(1mol/L pH8.0)
10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)
Bio-Gel P-60(精细级）可以从 Bio-Rad 公司购买，大多数化学试剂供应商可提供 Sephadex G-15(如 Sigma 公司）。Bio-GelP-60 是預胀后产品，而 Sephadex G-15 则必须在使用前膨胀及平衡。
破璃棉
为方便起见，本方案以 Bio-GelP-60 树脂为例，亦可同样有效地应用于 SepbadexG-15。
2. 用消毒巴斯德管制备 Bio-GelP-60 层析柱。
a. 用 10 倍体积的 Tris-SDS 层析缓冲液平衡厂家提供的 Bio-Gel P-60 树脂。
玻璃毛细管亦可作为很好的填塞工具。.
c. 准备好层析管后，倒入少量 Tris-SDS 层析缓冲液，检查缓冲液流速（以数秒一滴为宜)。
d. 将 Bio-GelP-60 树脂浆倒入层析管。树脂随重力下沉，缓冲液流出，柱身迅速形成。再加入树脂浆，使玻璃棉塞至吸管顶端附近的缢痕处完全被充填。
e. 用 3 mlTris-SDS 层析缓冲液冲洗柱子。
(体积 100ul 或稍小）。
4. 样品进入层析树脂后，立即加入 100ul 缓冲液，待缓冲液进入树脂后，即刻连续补充新的缓冲液，不要让层析柱流干。
5. 用手提式微型探测仪检测放射性标记寡核苷酸的流动。待流出液开始出现放射性时, 用微量离心管收集两滴液体。
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