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| 实验方法原理 | 活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。 |
|---|---|
| 实验材料 | 抗体血清 |
| 试剂、试剂盒 | RPMI1640DPBS洗涤液固定液 |
| 仪器、耗材 | 玻璃管塑料管离心机显微镜 |
| 实验步骤 | 1. 制备活性高的细胞悬液（培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法）
2. 用10 ％FCS RPMI1640调整细胞浓度为5×106～1×107 /ml
7. 加适量固定液（如为FCM制备标本，一般加入1 ml固定液，如制片后在荧光显微镜下观察，视细胞浓度加入100～500 μl固定液）
8. FCM检测或制片后荧光显微镜下观察（标本在试管中可保存5～7 天） 展开 |
| 注意事项 | 1. 整个操作在4 ℃下进行，洗涤液中加有比常规防腐剂量高10倍的NaN3，上述实验条件是防止一抗结合细胞膜抗原后发生交联、脱落。 |
| 其他 | 一、附录 NaCl 80 g，KCl 2 g，蒸馏水加至1000 ml，Na2HPO4 11.5 g，临用时用蒸馏水1∶10稀释，KH2PO4 2 g DPBS 900 ml，FCS 50 ml（终浓度5 ％），4 ％ NaN3 50 ml（终浓度0.2 ％） DPBS 1000 ml，葡萄糖 20 g（终浓度2 ％），甲醛 10 ml，NaN3 0.2 g （终浓度0.02 ％） 展开 |
