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Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤

产品信息
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
  公司是Z专业的ATCC细胞供应商，提供Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤的报价，咨询，称技术服务，欢迎来电咨询选购。
细胞名称  Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤
形态特性   上皮样　
生长特性  贴壁生长,在软琼脂中成簇生长，并可悬浮生长　
特征特性   该细胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件   F12K  10%FBS；400ug/ml G418　
传代方法   1:3~1:6传代；每周2~3次换液。
传代情况  C3
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测  培养法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；
同工酶  
染色体  
使用权限  A类
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2）公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，ZX不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本ZX未进行核实，仅供参考。
4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤复苏操作要点： 
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
 50mg/支盐酸阿糖胞苷Cytarabine hydrochloride
约20mgβ-丙氨酸Beta alanine
50mg/支醋酸精氨酸Arginine acetate
20mg/瓶聚普瑞锌Polaprezinc
50mg/支L-肌肽L- Carnosine
约329单位胰激肽原酶Pancreatic kininogenase
15mg胸腺法新Thymalfasin
30mg/瓶三磷酸胞苷二钠Three?of two?sodium?cytidine triphosphate
25mg门冬氨酸钾Potassium aspartate
25mg门冬氨酸镁Magnesium aspartate
约10mg/支戈那瑞林Gore Bernard Relin
约0.3ml角鲨烷Jiao Shawan
6u尖吻蝮蛇血凝酶Heamocoagulase Agkistrodon
约20mg普罗瑞林Protirelin
50mg门冬氨酸鸟氨酸Ornithine aspartate
50mg门冬酰胺Asparagine
10mg氧化型谷胱甘肽Oxidized glutathione
15mg/支醋酸曲普瑞林Triamcinolone?Pu Ruilin
98079-52-8保存：-20℃K0043盐酸洛美沙星/(±)-1-乙基-6,8-二氟-1,4-二氢-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧喹啉-3-羧酸盐酸盐/盐酸氟罗沙星/Lomefloxacin hydrochlorideUSP级，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，
25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai，
 
中文名称： 盐酸洛美沙星 
其他中文名称： (±)-1-乙基-6,8-二氟-1,4-二氢-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧喹啉-3-羧酸盐酸盐；盐酸氟罗沙星 
英文名称： Lomefloxacin hydrochloride 
产品规格： USP级，98% 
包装：5克/25克 
CAS号：98079-52-8 
C17H20ClF2N3O3= 387.81
级别：USP Grade
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤含量：≥98.0%
PH：3.5～4.5
重金属：≤20ppm
性状：粉末
用途：生化研究。KJ谱：革兰氏阳性菌和阴性菌。本品仅供科研使用
保存：-20℃

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