Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤

Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

细胞名称   Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤
形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长，并可悬浮生长

特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件 F12K 10%FBS；400ug/ml G418

传代方法 1:3~1:6传代；每周2~3次换液。

传代情况 C3

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；

同工酶

染色体

使用权限 A类

Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
稳定表达EBNA1的人胚肾细胞;293E

TMED4 Others Human 人 TMED4 / ERS25 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0376LA795(小鼠肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2

Pcc4细胞，胚癌细胞 人白血病细胞,SK细胞 Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33

高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd

CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人细胞裂解液 (阳性对照)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CM-H020人胰岛β细胞完全培养基100mL

胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒构建稳定株)人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 灭HX清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重组大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 标签)

人表皮角质细胞-新生儿(HEK-n)( 5×105 ) 细胞名称 种属
CM-H020人胰岛β细胞完全培养基100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒构建稳定株)人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 灭HX清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重组大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 标签)

人表皮角质细胞-新生儿(HEK-n)( 5×105 ) 细胞名称 种属
醋酸醋杆菌食用支/瓶  进口分装  DL-乳酸(USP)  DL-Lactic acid  CAS号：  50-21-5  质量规格：  88~92%，USP

短短芽孢杆菌支/瓶  进口分装  没食子酸一水物(标准品)  Gallic acid monohydrate  CAS号：  5995-86-8  质量规格：  HPLC>98%,标准品

佛罗里达侧耳、蚝菇支/瓶  进口分装  蜜二糖  Melibiose  CAS号：  585-99-9  质量规格：  >98%,水合物

海藻希瓦氏菌产土霉素支/
人抗肝细胞膜抗体elisa试剂盒  进口分装  D-松醇（标准品）  D-Pinitol  CAS号：  10284-63-6  质量规格：  95%，标准品

人抗肝细胞胞质1型抗体elisa试剂盒  进口分装  松果菊苷（标准品）  Echinacoside  CAS号：  82854-37-3  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人抗肝特异性脂蛋白抗体elisa试剂盒  进口分装  松萝酸(标准品)  Usnic acid  CAS号：  125-46-2  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

人抗Sc1-70抗体elisa试剂盒  进口分装  松脂醇二葡萄糖苷（标准品）  Pinoresinol diglucoside  CAS号：  63902-38-5  质量规格：  HPLC≥98%，标准品
Cas9稳定表达的人前列腺癌细胞；PC-3-Cas9-579操作步骤人生长分化因子6(GDF6)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装   酸性红9  英文名称：  Acid red 9  CAS号：  8003-59-6  分子式：  400.38  分子量：   C20H13N2NaO4S

人头蛋白(NOG)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装   直接青莲N  英文名称：  Direct violet n  CAS号：  2586-60-9  分子式：  728.66  分子量：   C32H22N6Na2O8S2

人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM1)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装   6-溴靛红  英文名称：  Isatin 6- bromide  CAS号：  77603-45-3  分子式：  226.03  分子量：   C8H4BrNO2

人胞浆磷蛋白1(STMN1)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装   噻唑蓝(MTT)  英文名称：  Thiazolyl blue (MTT)  CAS号：  298-93-1  分子式：  414.32  分子量：   C18H16BrN5S

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