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细胞名称 人髓母细胞瘤细胞;Daoy操作步骤
形态特性 多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是1985年由Jacobsen PF建立的,源自一名4岁大的儿童的后颅窝肿瘤的活检组织,未检出神经元和胶质分化的特征;可用作转染宿主。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:4~1:6传代;每周换液2~3次。
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:13,14;D16S539:10;D18S51:12;D19S433:14,14.2;D21S11:29,31.2;D2S1338:16,17;D3S1358:15;D5S818:11,13;D7S820:8,10;D8S1179:13,15;FGA:23;TH01:9;TPOX:8,10;vWA:14,20;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人髓母细胞瘤细胞;Daoy操作步骤操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
人髓母细胞瘤细胞;Daoy操作步骤复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过Z易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人髓母细胞瘤细胞;Daoy操作步骤培养温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
2)公司细胞资源ZX承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,ZX不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本ZX未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
HPLC≥98%;20mg/vial贝母素乙Peiminine18059-10-4
HPLC≥98%;20mg/vial贝母甲素Peimine23496-41-5
HPLC≥98%;20mg/vial具栖冬青苷Pedunculoside42719-32-4
HPLC≥98%;20mg/vial大蓟苷Cirsium japonicum?glycoside28978-02-1
HPLC≥98%,20mg/vial4-羟基肉桂酸4- hydroxy?cinnamic acid501-98-4
HPLC≥98%;20mg/vial百秋李醇Hundreds of?autumn Li Chun5986-55-0
HPLC≥98%;20mg/vial小白菊内酯Parthenolide20554-84-1
HPLC≥98%;20mg/vial人参三醇Ginseng three?alcohol32791-84-7
HPLC≥98%;20mg/vial人参二醇Panaxadiol19666-76-3
F00289050-68-4Pharmacia17-0010-01原装葡聚糖凝胶G-10/交联葡聚糖凝胶G-10/交联右旋糖酐凝胶G-10/Sephadex G-10分离:肽及球形蛋白质:~700;葡聚糖(线性分子):~700100克RT
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,25克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,100克
中文名称: 葡聚糖凝胶G-10
其他中文名称: 交联葡聚糖凝胶G-10;交联右旋糖酐凝胶G-10
英文名称: Sephadex G-10
其他英文名称: Cross-inked dextran gel G-10
产品规格: 国产
包装:25克/100克
CAS号:9050-68-4
干颗粒直径:40~120um
分子量分级范围:A.肽及球形蛋白质:~700;B. 葡聚糖(线性分子):~700
床体积毫升/克干分子筛:2~3ml/g
人髓母细胞瘤细胞;Daoy操作步骤PH:2~13
性状:珠粒或粉末,属亲水性凝胶。性稳定,不溶于水、弱酸和碱溶液,遇强酸能使糖苷键分解
用途:生化研究。用于凝胶过滤,分离分子量接近的小分子,脱盐,多肽分离,清洗生物提取液,分子量测定
保存:RT