MKN45-GFP人胃癌细胞-绿色标记
- 产地：上海
- 供应商：上海琛艺实业有限公司
- 供应商报价：面议
- 标签：MKN45-GFP人胃癌细胞-绿色标记,-1,上海琛艺实业有限公司
产品库
| 品Pai | 自营品Pai | 货号 | MKN45-GFP |
|---|---|---|---|
| 规格 | T25瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | MKN45-GFP细胞大学与医院科研 | 应用领域 | YL/卫生,环保/水工业,化学品检测,生物产业,石油/化工 |
上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株，其中人的已通过STR鉴定的有几百株，欢迎各位选购。。。。。。
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产品名称：MKN45-GFP人胃癌细胞-绿色标记
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！
组份 | 数目 |
细胞 | 1 T-25瓶 |
细胞说明书 | 一份 |
生长特性： | 贴壁生长
|
细胞来源： | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件： | 培养基：1640 +10%FBS（推荐德国BI 04-002-1A 优等胎牛血清） 气相：空气95%，二氧化碳5% 温度：37℃ |
培养： |
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，次传代比例为1:2。 3传代步骤：将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入1mlPBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为Z佳消化时间，记录Z佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
二、悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，然后置于无菌操作台，打开瓶口，轻轻吹打后，将其中的细胞悬液转移到离心管中，然后1200rpm离心3min，去上清； 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鲜培养基，然后将其置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液（离心后去旧液，加入新鲜培养基）； 3.显微镜观察细胞数目比较多时，对其进行传代，次传代比例为1:2（离心后平均分成两瓶培养）。
|
细胞总数： | 1~3*106 |
传代周期： | 2-3天 |
传代比例： | 1:2~1:4 |
换液频率： | 2-3天 |
冻存液： | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事项：
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察，大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常，继续培养，剩余漂浮的细胞可以去掉；若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力，并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片，记录细胞状态，如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题，超过时间我段，本公司则默认细胞状态良好，不免费对后续细胞状态问题进行售后。
做细胞实验的同学看过来。
选择上海琛艺生物细胞有3个理由：
1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞之一;
2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;
3、使用我司推荐的进口品Pai血清进行培养实验，效果更佳。
有关细胞有丝割裂的试验方法
(一)试验原理
细胞有丝割裂指数(mitotic index，MI)是指归于割裂期的细胞占总细胞数的百分率．用于表明细胞增殖旺盛的程度，也可用于检测药物对细胞增殖能力的影响。用盖玻片培育法培育细胞，做固定和染色后，镜下调查和计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数并核算MI。
(二)资料
1．待检资料(药物)。
2．细胞培育成层的贴壁细胞。
3．试剂 甲醇、3％吉姆萨染液。
4．器件CO2培育箱、倒置显微镜、盖玻片(2．2 cm×2．2 cm，需预先清洗和灭菌处理)、塑料培育皿(3．5 cm)、载玻片、封片用盖玻片、中性树胶。
(三)试验方法
1．将细胞消化成单个细胞悬液，将细胞悬液分瓶培育，分成不加药的对照组和加人不同剂量药物的试验组。
2．细胞传代培育的方法培育细胞，并制成浓度为105／ml的细胞悬液。
3．将清洗和灭菌处理的盖玻片放置在塑料培育皿中，将细胞悬液摇匀后接种于培育皿中，各皿中接种量相同。
4．分别于培育24 h、48ht和72h后从培育皿中取出盖玻片，在Hanks液中漂洗2～3次。
5．先用甲醇固定30 min，再用吉姆萨染液染色。晒干后用中性树胶封片。
6．油镜下或高倍镜下计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数。
7．核算MI按下列公式核算MI。
(四)成果与分析
将对照组和药物组的试验成果绘制成直方图并加以比较，也可绘制成MI曲线进行比较：
(五)注意事项
1．为了削减差错，试验者有必要了解各期割裂象细胞的形状特征，该试验自始至终Z好由一人完结，当两人以上调查时，应掌握相同的标准。
2．MI曲线与细胞生长曲线趋势根本相似，但不彻底相同。如果在细胞增长达饱满密壁并进入中止期后．细胞数量许多，而割裂象细胞可彻底消失。
3．细胞在盖玻片上的密度常不均匀，细胞密集区与区的割裂象细胞数目或许不同。计数时要选择密度近似区，以削减试验差错。
