10 X Genomics单细胞测序

10 X Genomics单细胞mRNA测序是一种在单个细胞水平对mRNA进行高通量测序的新技术。10 X Genomics平台能够一次性分离500~10000个单细胞，并能够将分离的单个细胞中的微量mRNA通过GX扩增后再进行高通量测序，有效地解决了组织样本无法破解的细胞异质性难题，有助于发现新的细胞类型；其基于大量的单细胞基因表达数据，可以提供细胞表达特征聚类、亚群表达特征的分析、标志物筛选等方面的分析，是一种GX的细胞基因表达水平的检测技术，在生殖、免疫、干细胞分化、肿瘤发SF展等研究领域中有着广泛的应用。 
承启优势：
高通量：一次同时8个样本，每个样本可测500-10000个细胞；
捕获效率高：捕获效率高达65%以上；
应用范围广：动植物细胞、肿瘤细胞异质性、肿瘤微环境、免疫细胞群体检测等；
成本低：单个细胞的费用从几千元降低到几十元。
周期短：6分钟内完成上万个细胞封装，一天之内完成细胞悬液制备、单细胞捕获、扩增以及建库；

 项目流程：



单细胞悬液要求：
1. 细胞总量：细胞不低于106个；浓度不低于1000cell/μl，每个样本不少于100μl；
2. 细胞活性：细胞存活率大于90%（活性越高越好，至少80%）；
3. 细胞大小：细胞直径不超过40μm；
4. 悬浮液中细胞不能成团（显微镜），少碎片，不要存在反转录YZ剂及非细胞的核酸分子，尽量保证细胞的完整性。
5. 培养基及缓冲液中不能含有Ca2+和Mg2+等影响酶活性的物质。
 
检测样品类型：
1. 新鲜组织（不可冻存）
Tips：由于固定引起的化学变化，单细胞基因组测序技术目前于新分离的组织样本。
2. 贴壁或悬浮培养细胞，单细胞悬浮液，干细胞，浸润淋巴细胞等。
3. 全血PBMC细胞悬液

分析内容：
细胞表达特征聚类、亚群表达特征的分析、标志物筛选等方面的分析。

*  5例样本起