PA-1人卵巢畸胎瘤细胞系 细胞ZX复苏传代
麦康凯琼脂,英文名:MacConkey Agar,用途:用于肠道菌选择性分离
V-KM培养基,英文名:V-KM Medium,用途:用于原生质体的培养,每100ml需添加2ml椰子乳
果蝇培养基,英文名:Drosophila Medium,用途:用于果蝇的培养
酵母膏-麦芽膏琼脂,英文名:ISP Medium 2(Yeast Extract Malt Extract Agar),用途:用于链霉菌属的培养鉴定
人核因子(NF)ELISA试剂盒,英文名:Human NF ELISA Kit,规格:48T/96T
人集蛋白(CASQ)ELISA试剂盒,英文名:Human CASQ ELISA Kit,规格:48T/96T
HVT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHCC-97H细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
哥伦比亚肉汤,英文名:Columbia Broth,用途:用于细菌的培养
ZG蓝琼脂,英文名:China Blue Agar,用途:用于肠道致病菌的选择性分离
细胞背景资料:详见相关文献介绍
改良GC肉汤基础,英文名:Modified Giolitti-Cantoni Broth Base,用途:用于葡萄球菌MPN计数,需添加0.1ml1%亚碲酸钾溶液(1%亚碲酸钾溶液)
豆芽汁蔗糖琼脂培养基,英文名:Soybean sprout Extract Sucrose Agar Medium,用途:用于真菌尤其是霉菌的培养
COR-L279细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MLE 12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H157细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
B10BR细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L-WRN细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Sall BclxL C1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2传代
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Huh-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COLO201细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HN6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSC-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
kyse-30细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VX2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
c918细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
TYC琼脂培养基,英文名:Tryptone Yeast Cystine Agar Medium,用途:用于血链球菌的分离,可添加杆菌肽0.2U/ml以增加选择性
厌氧菌肉汤MIC,英文名:Anaerobe Broth MIC,用途:用于肉汤微量稀释法测定厌氧菌敏感性养和厌氧菌培养
M17肉汤,英文名:M17 Broth,用途:用于牛奶和乳制品中乳酸菌的检测,每100ml添加1支10%乳糖溶液
细胞生长特性:贴壁生长
M-肉汤,英文名:M-Broth,用途:用于干燥食品和种子中沙门氏菌的增菌和培养
NCI-H3255细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
293 [HEK-293]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSAS2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A375.S2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
HepG2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
HONE-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TCAM-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MRC-9细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
1/2MS培养基,英文名:1/2 Murashige & Skoog Medium,用途:大量元素减半,微量元素和维生素不变,不含琼脂和蔗糖
人基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA试剂盒,英文名:Human MMP3 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞形态特性:上皮细胞
人淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1)ELISA试剂盒,英文名:Human APLP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠沉默调节蛋白6(SIRT6)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SIRT6 ELISA Kit,规格:48T/96T
人甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒,英文名:Human AFP ELISA Kit,规格:48T/96T
DF-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PZ-HPV-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细菌保存培养基,英文名:Bacteria Save Medium,用途:用于菌种培养与保存(pH7.3)
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础,英文名:Trypticase Soy Polymyxin Broth Base,用途:用于蜡样芽胞杆菌MPN试验,每100ml添加1支胰酪胨大豆多粘菌素肉汤添加剂
NAC液体培养基,英文名:Nalidixic Acid Cetrimide Broth,用途:——用于微生态活菌制品中铜绿假单胞菌选择性增菌
化钠营养琼脂,英文名:NaCl Nutrient Agar,用途:用于副溶血性弧菌的纯化
大鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒,英文名:sm Actinin-α ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:4-1:10传代;每周2-3次。
人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA试剂盒,英文名:Human PTGDS ELISA Kit,规格:48T/96T
人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒,英文名:Human AChRab ELISA Kit,规格:48T/96T
Hce-8693细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NRK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SLB培养基,英文名:Saline Lactose Broth Medium,用途:用于CJ过滤器的细菌截留验证
K氏培养基基础,英文名:K’s Medium Base,用途:用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需使用苹果酸调节pH
R2A琼脂,英文名:R2A Agar,用途:用于纯化水等制YY水中需氧菌总数测定
人血管活性肽酶YZ剂(VPI)ELISA试剂盒,英文名:Human VPI ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MPO ELISA Kit,规格:48T/96T
人YY1转录因子(YY1)ELISA试剂盒,英文名:Human YY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H1792细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3-1:8传代。
EOC 20细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCLP-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。