手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于Z快速、Z有效的检测产品，包括手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)大量库存促销在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)大量库存促销
编号：SYA211
规格：48次/盒
品Pai：百奥莱博
产地：北京

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·马源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA295
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·志贺氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA003
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Shigella
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰氏阴性杆菌，是人类细菌性痢疾Z为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。人类及其它动物对志贺氏菌易感，10-200个细菌即可致病。本方法为荧光PCR检测方法，反应在同一管内进行，操作简单，并有效防止了污染，能对样品中或预培养液中的志贺氏菌进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。志贺氏菌的探针报告基团为FAM，淬灭基团为None。

二、用途：
该试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及食品中志贺氏菌的检测。

三、试剂盒组成：(50T/Kit)
组份 数量 规格
志贺氏菌荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX) 1管 750μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Shig-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品采集与预培养参照《中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验(GB 4789.5-2012)》要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取(用户可根据需要选择商业化DNA提取试剂盒)
6.2.1 培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μl DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(Shig-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Shig-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(Shig-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明Shig核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Shig核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Shig qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明Shig核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管Z好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·猪口蹄疫病毒A型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA645
等级：科研实验专用
规格：192次/盒|480次/盒

·猪链球菌病(PSS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA443
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·大肠埃希菌O157:H7单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA008
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·甲型H1N1/甲型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA166
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Escherichia coli O157:H7
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对甲型流感病毒特异性引物，一对甲型H1N1特异性引物，分别结合一条特异性荧光探针，用一步法双重荧光RT-PCR技术对甲型流感病毒RNA、流感H1N1病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中甲型流感病毒的探针报告基团为VIC/HEX/JOE，流感H1N1病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中甲型流感病毒和H1N1亚型流感病毒。可用于甲型流感病毒和H1N1亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

二、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
甲型流感/H1N1荧光qRT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI7500荧光定量PCR检测仪。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(Z好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 样品RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光RT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-RT-PCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1 µL N×1 µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。总体系20µL。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 报告基团：设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道，可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测H1N1，VIC/HEX/JOE基团检测IAV-A，淬灭基团均为None，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道全部阴性。
（2） 阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） FAM通道：Ct值≤35 H1N1亚型流感病毒核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明H1N1亚型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明H1N1亚型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。
（2） HEX/VIC/JOE通道：Ct值≤35 甲型流感病毒核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明甲型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明甲型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管Z好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·猪西尼罗河热病毒(WNFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA417
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·霍乱弧菌毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA076
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛结核杆菌抗体ELISA检测试剂盒(筛选)
编号：SYA653
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·玉米转基因Bt11单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA279
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·新布尼亚病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA249
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对新布尼亚病毒特异性引物，结合特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对新布尼亚病毒 RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中新布尼亚病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于新布尼亚病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
新布尼亚荧光qRT-PCR反应液 1管 960μL/管
酶混合物 1管 48μL/管
阴性对照 1管 250μL/管
阳性对照 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的处理与RNA提取
6.1 样品前处理
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.2g于研磨器中研磨，加入1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL 灭菌离心管中；液体样品，直接取100μL提取。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液、RT-PCR Reaction Buffer、酶混合物，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光SFTSV反应液 20µL N×20µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 21µL N×21µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照/阳性对照4μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 42℃ for 20 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值<35的样本为阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性。
（2） Ct值显示为无或Ct值≥38的样本为阴性样本，表明新布尼亚病毒核酸阴性。
（3） 如果35≤Ct值<38，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行新布尼亚病毒 qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明新布尼亚病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管Z好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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