北京手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)厂家价格
- 品牌:百奥莱博
- 型号:北京百奥莱博科技有限公司
- 产地:北京
- 供应商:北京百奥莱博科技有限公司
- 供应商报价:¥130 - 1630
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括北京手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)厂家价格在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:北京手足口病肠道病毒荧光PCR检测试剂盒(EV71)厂家价格
规格:48次/盒
品Pai:百奥莱博
等级:科研试剂
编号:SYA211
产地:国产|进口.jpg)
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编号:SYA236
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA178
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA423
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
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编号:SYA556
等级:科研实验专用
规格:10次/盒|48次/盒
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等级:科研实验专用
规格:192次/盒
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编号:SYA159
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规格:48次/盒
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编号:SYA652
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·鸡源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA293
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对鸡源性成分特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术对鸡源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中鸡源性成分的探针报告基团为FAM。
二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中鸡源性成分的检测。
三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
鸡物种荧光qPCR反应液(Chicken-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Chicken-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Chicken-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Chicken-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(Chicken-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鸡源性成分核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鸡源性成分核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鸡源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鸡源性成分核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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·猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA471
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪细小病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA778
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对猪细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对猪细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测带毒猪血液、分泌物、排泄物以及肾、肺、肝、脑、睾丸、淋巴结和胎盘等组织标本中猪细小病毒(PPV)DNA,用于猪细小病毒(PPV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
荧光PCR反应液 1管 672μL/管
阴性对照 1管 50μL/管
阳性对照 1管 50μL/管
FD1试剂 1瓶 15mL/瓶
FD2试剂 1管 500μL/管
FD3试剂 1瓶 15mL/瓶
FD4试剂 1瓶 30mL/瓶
FD5试剂 2管 2mL/管
吸附柱及收集管 1包 48套/包
四、储存条件及有效期
荧光定量PCR试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月;DNA提取试剂盒于常温保存,有效期为12个月。1.5mL离心管、移液器、吸头等请自备。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
6.2.1 在上述样本中加入300μL FD1试剂和10μL FD2试剂,震荡混匀;
6.2.2 58℃孵育至完全裂解(样品不同而异,细菌、液体样本建议孵育15min,动物细胞、组织和粪便样本建议孵育15min-1h,样本裂解越完全,核酸提取效果越好);
6.2.3 12000 rpm离心5min,转移上清于一无菌离心管中;
6.2.4 在2.3的离心管中加入300ul FD3试剂,震荡混匀;
6.2.5 将全部溶液加入带膜吸附柱(收集管)中,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.6 加入600ul的FD4试剂,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.7 12000 rpm离心2min,去除残留液体;
6.2.8 将吸附柱放置于新的无核酸酶的1.5 mL离心管中,在膜ZY加入20-50µL FD5试剂,室温静置1min,12000rpm离心1min,收集核酸溶液,-20℃保存,若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(PPV-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性质控品(NTC)/阳性质控品(PPV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PPV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明猪细小病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明猪细小病毒核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行猪细小病毒qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明猪细小病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。.jpg)
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