Southern Blot 印迹杂交实验服务

实验技术原理：Southern 印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链 DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特 定DNA分子的含量。

实验操作流程：

1、制备待测DNA

2、DNA限制酶消化

3、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品

4、电泳凝胶预处理

5、转膜

6、探针标记

7、预杂交

8、Southern杂交

9、洗膜

10、放射性自显影检测

11、实验结果分析及报告

 

实验注意事项：

客户提供：

1、待杂交目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒（如自带引物，请提供引物：100umol/ul，〉10ul,冰袋运输） 。

2、待杂交的高质量DNA样品质量至关重要，决定实验的成败，请确保DNA抽提质量，尽量采用进口试剂盒提取,

3、如果无法提供高品质的基因组DNA样品，本公司可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品，客户提供样品要求如下：

A、菌液：不低于500ul，冰袋或者干冰运输

B、组织：总量不小于100mg，干冰运输

C、细胞：提供新鲜的细胞即可，尽量不要使用盐溶液冲洗

交付标准：

含Southern Blot 图片的实验报告单。