CRISPRi的原理 催化失活的Cas9（dCas9）连上转录YZ子，可以有效YZ基因组特定位点的转录，这一工具被称为CRISPRi。CRISPRi特别适合分析非编码RNA的具体功能。 CRISPRi载体介绍 pLVU9i-Puro第三代慢病毒载体，能够表达sgRNA和dCas9-KRAB，具有Puro抗性基因。KRAB是强转录YZ域。 pLVU9i-GFP是第三代慢病毒载体，能够表达sgRNA和dCas9-KRAB，具有EGFP荧光标记基因。KRAB是强转录YZ域。
CRISPRi质粒构建流程
CRISPRi质粒构建服务说明1、客户提供基因名称和基因编号。
2、HYY提供：
（1）3×20μg CRISPRi质粒，浓度500ng/μL以上，超螺旋率95%以上；
（2）3×500μL CRISPRi质粒的菌液；
（3）CRISPRi质粒的测序图谱、酶切鉴定结果和序列；
（4）CRISPRi质粒构建报告。
3、实验周期2～3周。
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