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MBD-Seq全面解决方案

产品信息
  • DNA甲基化对生命活动非常重要,是基因调控的手段之一(即通过对位于启动子及外显子区的CpG岛的甲基化而YZ基因的表达),它在维持细胞正常功能、传递基因组印记、胚胎发育、肿瘤发生等方面起着至关重要的作用,更是表观遗传学研究的热点。对于DNA甲基化的检测,目前采用甲基化DNA富集并结合高通量测序(MBD-Seq, Methylated DNA Binding Domain-Sequencing)的方法。由于在哺乳动物中甲基化一般发生在CpG的胞嘧啶5位碳原子上,所以可通过特异性结合甲基化DNA的蛋白MBD2b或5’-甲基胞嘧啶抗体富集高甲基化的DNA片段,并结合第二代高通量测序,对富集到的DNA片段进行测序,从而检测全基因组范围内的甲基化位点。
    一、技术路线和方法:


    二、生物信息学分析

    2.1 基本数据分析
    分析模块01:测序数据预处理
    分析模块02:序列比对与序列富集区域(peak)的预测
    分析模块03:peak的基因组注释与分布
    分析模块04:甲基化GC含量比率
    分析模块05:差异peak筛选(DMR,Differentially methylated region)
    分析模块06:差异peak对应基因的GO分类
    分析模块07:差异peak对应基因的pathway分析
    分析模块08:差异peak对应基因的互作网络构建
    2.2 高级数据分析
    分析模块09:转录因子预测分析
    扫描CpG岛区域的转录因子结合位点。因为一般情况下甲基化会使转录因子与DNA的结合力下降,导致基因转录水平的降低。因此转录因子的分析可以解释甲基化导致转录YZ的机理。

    三、测序平台
     
    Illumina平台 测序平台 模式 数据量 一个lane样品数 货号
    MBD-seq Hiseq2000 1×50 3-4M reads 12 BT2000311
    MBD-seq Hiseq2000 1×50 20-30M reads 2 BT2000312
    MBD-seq GAII 1×60 8Mreads 4 BT2000313

    四、完成时间
    3个月,(其中生物信息分析1个月)
    所有版权及解释权归BIOTREE公司所有!
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