X-α-Gal 检测GAL4系统的酵母双杂交作用

X-α-Gal

X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物，用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选，快速和简便地识别阳性的蓝色克隆，无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。         

X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活，MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因，编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色，即阳性的双杂交作用。

用  途：

（1）α-半乳糖苷酶的显色底物，形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用，利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays；

（2）用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌；

（3）在组织化学中用于酶活性的检测；

储存液的配制及使用步骤：

A）涂布于预制平板：溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF，终浓度为4mg/ mL的溶液。

①涂布200ul(15cm) 或者100ul（10cm）X-α-gal 储存液于预制平板上；

②放于37℃培养箱至液体被吸收（由于DMF挥发性低，Z长可放4小时）；

③将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。

B）直接加入琼脂中：溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF，终浓度为20mg/ mL的溶液。

①将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55 ℃；

②往已冷却的培养基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal储存液，混匀，快速倒平板。

外  观：白色或灰白色结晶粉末，或者无色结晶；

溶 解 度（1%甲醇溶液）：无色，清澈；

储  存： -15°C避光避潮保存；

产品信息：现货供应