siRNA/microRNA/过表达慢病毒包装（慢病毒载体构建，慢病毒包装，滴度测定)

1 、特点：

1.1 直接包装成为假病毒颗粒，对分裂和非分裂细胞均有感染作用，适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。

1.2 可以通过简单方式，在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。

1.3 可用于基因敲除、基因ZL和转基因动物研究。

1.4 无需任何转染试剂，操作简便。

1.5 可以根据客户需要制备多种标记。

 

2 、原理：

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。

 

3 、慢病毒包装简要流程：

3.1 含有目的基因的慢病毒表达载体的构建和质粒纯化提取。

注：客户也可以提供构建好的重组慢病毒表达载体。

3.2 慢病毒表达载体与包装系统共转染病毒包装细胞。

3.3 收集病毒液。
3.4 纯化和浓缩病毒。

3.5 分装、- 80 ^oC保存。
3.6 滴度测定及无菌检测。

 

4 本公司提供的产品包括：

4.1 重组后的慢病毒载体质粒以及测序图谱（客户提供质粒的除外）。

4.2 病毒无菌检测结果。

4.3 慢病毒储液及相应的病毒滴度。

 

5 我们保证：

5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性（客户提供质粒的除外）。

5.2 病毒颗粒的总数和病毒滴度：如无特殊要求我们提供1mL滴度为1×10⁷ - 1×10⁸ vp/ mL的病毒储液。 

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