原核表达与蛋白纯化
- 型号：原核表达与蛋白纯化
- 供应商：百奥迈科生物技术有限公司
- 供应商报价：￥9000
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产品库
原核蛋白表达与纯化
| Expression Vector | Promoter | 载体所含Tag |
| pET3a, pET11a, pET24a | T7/ac | None or T7 Tag |
| pET32a | T7/ac | TRX & HIS |
| pET41a | T7/ac | GST & HIS |
| pET22b, pET25b, pET26b | T7/ac | Secret/分泌表达 |
| pET28a, pET15b, pRSETb | T7/ac | HIS |
| pET50b, pET43a | T7/ac | Nus, HIS |
| pPEPTIDE | T7/ac | HIS |
| pMAL-c2x | T7/ac | MBP |
| pGEX4T, pGEX5X, pGEX6P | T7/ac | GST |
| pQE30 | T5 | HIS |
| pTrcHisB | Trc | T7, HIS |
| pTWIN | T7/ac | Intein, CBD |
| pBV220 | PRPL | None |
提供客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
步骤3. E. coli 表达菌株转化及筛选◆将表达质粒转化到GX的E. coli表达菌株中，至少挑选5个阳性克隆进行诱导表达目标蛋白；◆SDS-PAGE电泳检测目标蛋白的表达情况，从中挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。◆可提供表达菌株：BL21(DE3), BL21(DE3)Lys，BL21-CodonPlus, Rosetta-gami。提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
步骤4. 目标蛋白表达及纯化◆摇瓶培养重组细菌，诱导表达目标蛋白；◆亲和，离子交换，疏水层析等多种层析方法纯化表达的重组蛋白；◆SDS-PAGE电泳检测每步结果控制产品质量；◆Western-blot验证目标蛋白正确性。提供客户：纯化好的目标蛋白3~10mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的蛋白，纯度可达90%以上。
步骤5. 目标蛋白的再加工及详细检测◆对生物学活性要求较高的纯化后蛋白产品进行复性研究：利用多达20种不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。◆除内毒素，CJ，冻干等进一步加工；◆通过HPLC，质谱等方法详细检测目标蛋白的质量。提供客户：加工后的终产品及相关实验和检测报告。
步骤6. 大规模制备按照小试工艺放大生产规模，制备客户需要的合格蛋白产品。提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。
