γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒-可见分光光度法

试剂一;液体×1 瓶，4℃保存。 试剂二;粉剂×1 瓶，4℃保存 临用前加6 mL 蒸馏水充分震荡溶解。 试剂三;粉剂×1 管，4℃保存 临用前加入蒸馏水1.5 mL 充分震荡溶解。 试剂四;液体×1 瓶，室温保存? 试剂五;粉剂×1 瓶，4℃保存 临用前加入12 mL 蒸馏水，充分震荡溶解后，缓缓加入400μL浓硫酸（自备），边加边搅拌。
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工作原理：
在ATP 和Mg2+存在下，GCL 催化谷氨酸和半胱氨酸合成却-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP 去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL 活性。
测定意义：
GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 对 GCL 有反馈YZ作用。GCL 基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL 活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。
标本处理：
1. 组织按照组织质量g：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积mL为500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率率300w，超声3 秒，间隔7秒，总时间3min），然后12000rpm，4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。
订购流程：γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒-可见分光光度法
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注意事项：γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒-可见分光光度法
影响显色反应的主要因素有哪些？
影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶液的酸度、显色时间以及干扰离子等。
为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择Z适宜的测量条件？
一般从以下几个方面来考虑：
①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在吸收波长也有吸收,则应根据：吸收大，干扰小”的原则来选择测量波长
②调价溶液的浓度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内。
③选择适当的参比溶液。
在分析复杂样品时，如何消除干扰？
消除干扰方法主要有：
1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法；
4、分离干扰离子。
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