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细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法

细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。

实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(DY抗体),二者可以发生特异性的抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物,再加入市售(也可自制)的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体(第二抗体),可以与复合物进一步发生抗原抗体反应(二次抗体反应),这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。
实验材料

HeLa细胞

试剂、试剂盒

1640培养液小牛血清甲醛固定液PBS液体石蜡

仪器、耗材

盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器

实验步骤

1.  将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中,培养2~3天。










2016-04-05
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